动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2013年
10期
9-14
,共6页
山羊痘病毒%小反刍兽疫病毒%实时荧光定量RT-PCR%探针
山羊痘病毒%小反芻獸疫病毒%實時熒光定量RT-PCR%探針
산양두병독%소반추수역병독%실시형광정량RT-PCR%탐침
为实现对山羊痘病毒(GTPV)和小反刍兽疫病毒(PPRV)的同步快速检测,基于GTPV的ITR基因及PPRV的M基因,分别设计合成两套特异性引物及探针；探针分别用5'-FAM-TAMRA-3’及5'-JOE-Eclipse-3'标记物进行标记以实现同步检测.结果显示,所建立的ITR-M二联探针荧光定量RT-PCR方法可同时特异性检测GTPV和PPRV产生特异性荧光信号,而对禽痘病毒、犬瘟热病毒等相关病毒无荧光信号可检出.以GTPV-ITR和PPRV-M的pMD-18T载体质粒为标准品,构建了双重标准曲线,ITR M探针的检测敏感度可分别达103拷贝/μL及101.2拷贝/μL cDNA.本研究初步建立了可同步快速检测GT-PV和PPRV的二联实时荧光定量RT-PCR法.
為實現對山羊痘病毒(GTPV)和小反芻獸疫病毒(PPRV)的同步快速檢測,基于GTPV的ITR基因及PPRV的M基因,分彆設計閤成兩套特異性引物及探針；探針分彆用5'-FAM-TAMRA-3’及5'-JOE-Eclipse-3'標記物進行標記以實現同步檢測.結果顯示,所建立的ITR-M二聯探針熒光定量RT-PCR方法可同時特異性檢測GTPV和PPRV產生特異性熒光信號,而對禽痘病毒、犬瘟熱病毒等相關病毒無熒光信號可檢齣.以GTPV-ITR和PPRV-M的pMD-18T載體質粒為標準品,構建瞭雙重標準麯線,ITR M探針的檢測敏感度可分彆達103拷貝/μL及101.2拷貝/μL cDNA.本研究初步建立瞭可同步快速檢測GT-PV和PPRV的二聯實時熒光定量RT-PCR法.
위실현대산양두병독(GTPV)화소반추수역병독(PPRV)적동보쾌속검측,기우GTPV적ITR기인급PPRV적M기인,분별설계합성량투특이성인물급탐침；탐침분별용5'-FAM-TAMRA-3’급5'-JOE-Eclipse-3'표기물진행표기이실현동보검측.결과현시,소건립적ITR-M이련탐침형광정량RT-PCR방법가동시특이성검측GTPV화PPRV산생특이성형광신호,이대금두병독、견온열병독등상관병독무형광신호가검출.이GTPV-ITR화PPRV-M적pMD-18T재체질립위표준품,구건료쌍중표준곡선,ITR M탐침적검측민감도가분별체103고패/μL급101.2고패/μL cDNA.본연구초보건립료가동보쾌속검측GT-PV화PPRV적이련실시형광정량RT-PCR법.
