中国实验方剂学杂志
中國實驗方劑學雜誌
중국실험방제학잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL TRADITIONAL MEDICAL FORMULAE
2013年
17期
258-262
,共5页
纤维化%肝星状细胞%化浊解毒方%胶原%氧化应激
纖維化%肝星狀細胞%化濁解毒方%膠原%氧化應激
섬유화%간성상세포%화탁해독방%효원%양화응격
fibrosis%Hsc-T6%Huazhuo Jiedu recipe%collegen%oxidative stress
目的:研究化浊解毒方含药血清对H2O2诱导的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)氧化应激的影响,以探讨化浊解毒方治疗肝纤维化的可能作用机制.方法:SD大鼠ig化浊解毒方不同剂量(0.3,0.6,1.2 g·kg-1),连续给药10 d,末次给药2h后取血,制备含药血清;常规培养活化的HSC-T6,采用0.1 mmol·L-1的H2O2制造HSC-T6氧化应激的模型,用不同浓度的含药血清进行干预,分为化浊解毒方组(高、中、低剂量组)、干扰素阳性对照组、模型组及空白对照组(不加任何药物的血清).干预72 h,放射免疫法检测细胞上清液中超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),还原性谷胱甘肽(GSH),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量,用RT-PCR及Western blot法检测HSC-T6培养上清液中Ⅰ型胶原(COL Ⅰ)及Ⅲ型胶原(COLⅢ)基因及蛋白表达.结果:与空白对照组比较,经过H2O2处理的HSC-T6上清液中SOD和GSH-Px的活性明显减低(P＜0.05),MDA和GSH的含量明显增加(P＜0.05);经化浊解毒方含药血清干预72 h后,其高、中剂量组能够提高SOD和GSH-Px的活性(P＜0.05),并降低细胞上清液中MDA和GSH的含量(P＜0.05),以高剂量组作用明显(P＜0.05);与空白对照组比较,HSC-T6上清液中COL Ⅰ及COLⅢ基因表达及蛋白含量经过H2O2刺激后明显增加(P＜0.05),经过化浊解毒方干预后,其胶原基因表达及蛋白水平明显降低,尤其高剂量组降低明显(P＜0.05).结论:化浊解毒方可以减轻因H2O2刺激造成的HSC-T6氧化应激反应,减少氧化应激产物产生,其效果与剂量呈正相关;从基因水平,化浊解毒方能够降低胶原基因的表达,同时抑制其蛋白转录,从而降低细胞外胶原含量,达到抑制肝纤维化的目的.
目的:研究化濁解毒方含藥血清對H2O2誘導的大鼠肝星狀細胞(HSC-T6)氧化應激的影響,以探討化濁解毒方治療肝纖維化的可能作用機製.方法:SD大鼠ig化濁解毒方不同劑量(0.3,0.6,1.2 g·kg-1),連續給藥10 d,末次給藥2h後取血,製備含藥血清;常規培養活化的HSC-T6,採用0.1 mmol·L-1的H2O2製造HSC-T6氧化應激的模型,用不同濃度的含藥血清進行榦預,分為化濁解毒方組(高、中、低劑量組)、榦擾素暘性對照組、模型組及空白對照組(不加任何藥物的血清).榦預72 h,放射免疫法檢測細胞上清液中超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),還原性穀胱甘肽(GSH),穀胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的含量,用RT-PCR及Western blot法檢測HSC-T6培養上清液中Ⅰ型膠原(COL Ⅰ)及Ⅲ型膠原(COLⅢ)基因及蛋白錶達.結果:與空白對照組比較,經過H2O2處理的HSC-T6上清液中SOD和GSH-Px的活性明顯減低(P＜0.05),MDA和GSH的含量明顯增加(P＜0.05);經化濁解毒方含藥血清榦預72 h後,其高、中劑量組能夠提高SOD和GSH-Px的活性(P＜0.05),併降低細胞上清液中MDA和GSH的含量(P＜0.05),以高劑量組作用明顯(P＜0.05);與空白對照組比較,HSC-T6上清液中COL Ⅰ及COLⅢ基因錶達及蛋白含量經過H2O2刺激後明顯增加(P＜0.05),經過化濁解毒方榦預後,其膠原基因錶達及蛋白水平明顯降低,尤其高劑量組降低明顯(P＜0.05).結論:化濁解毒方可以減輕因H2O2刺激造成的HSC-T6氧化應激反應,減少氧化應激產物產生,其效果與劑量呈正相關;從基因水平,化濁解毒方能夠降低膠原基因的錶達,同時抑製其蛋白轉錄,從而降低細胞外膠原含量,達到抑製肝纖維化的目的.
목적:연구화탁해독방함약혈청대H2O2유도적대서간성상세포(HSC-T6)양화응격적영향,이탐토화탁해독방치료간섬유화적가능작용궤제.방법:SD대서ig화탁해독방불동제량(0.3,0.6,1.2 g·kg-1),련속급약10 d,말차급약2h후취혈,제비함약혈청;상규배양활화적HSC-T6,채용0.1 mmol·L-1적H2O2제조HSC-T6양화응격적모형,용불동농도적함약혈청진행간예,분위화탁해독방조(고、중、저제량조)、간우소양성대조조、모형조급공백대조조(불가임하약물적혈청).간예72 h,방사면역법검측세포상청액중초양화물기화매(SOD),병이철(MDA),환원성곡광감태(GSH),곡광감태과양화물매(GSH-Px)적함량,용RT-PCR급Western blot법검측HSC-T6배양상청액중Ⅰ형효원(COL Ⅰ)급Ⅲ형효원(COLⅢ)기인급단백표체.결과:여공백대조조비교,경과H2O2처리적HSC-T6상청액중SOD화GSH-Px적활성명현감저(P＜0.05),MDA화GSH적함량명현증가(P＜0.05);경화탁해독방함약혈청간예72 h후,기고、중제량조능구제고SOD화GSH-Px적활성(P＜0.05),병강저세포상청액중MDA화GSH적함량(P＜0.05),이고제량조작용명현(P＜0.05);여공백대조조비교,HSC-T6상청액중COL Ⅰ급COLⅢ기인표체급단백함량경과H2O2자격후명현증가(P＜0.05),경과화탁해독방간예후,기효원기인표체급단백수평명현강저,우기고제량조강저명현(P＜0.05).결론:화탁해독방가이감경인H2O2자격조성적HSC-T6양화응격반응,감소양화응격산물산생,기효과여제량정정상관;종기인수평,화탁해독방능구강저효원기인적표체,동시억제기단백전록,종이강저세포외효원함량,체도억제간섬유화적목적.
