CAJ | 학술논문

目的:研究补中益气汤含药血清逆转人肺腺癌顺铂耐药细胞株(A549/DDP)耐顺铂(DDP)作用及其对磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-Akt)和P-糖蛋白(P-gp)表达的影响.方法:采用血清药理学方法制备含药血清,随机对照法将24只SD大鼠分为空白对照组(给生理盐水10 mL·kg-1),补中益气汤高、中、低剂量组(11.34,5.67,2.84 g·kg-1,10 mL·kg-1),每日ig给药1次,连续7d后提取血清.将A549/DDP分为空白血清组,补中益气汤高、中、低剂量含药血清组,阻滞剂组,高剂量含药血清联合阻滞剂(LY294002)组,MTT法检测各组细胞对DDP的IC50,并计算耐药逆转倍数.免疫细胞化学法检测各组细胞中p-Akt和P-gp蛋白的表达;逆转录-多聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测各组细胞中Akt和P-gp的mRNA表达.结果:与空白血清组比较,补中益气汤中剂量以上的含药血清可明显降低A549/DDP对DDP的IC50(P＜0.05),并呈浓度依赖效应,与阻滞剂联合效果最佳(P＜0.05);与A549/DDP空白血清组相比,补中益气汤中、高剂量含药血清组,阻滞剂组和高剂量联合阻滞剂组的p-Akt和P-gp的表达显著下降(P ＜0.01,P＜0.05),其中以高剂量联合阻滞剂组下降最多(P＜0.01);与A549/DDP空白血清组相比,中、高剂量含药血清组,阻滞剂组和高剂量联合阻滞剂组的P-gp的mRNA表达量都显著减少(P＜0.01,P＜0.05),中、高剂量含药血清组,高剂量联合阻滞剂组的p-Akt的mRNA表达量也显著减少(P＜0.05).结论:补中益气汤含药血清可逆转A549/DDP细胞的顺铂耐药,与LY294002联合应用效果更佳,其逆转机制可能与减少细胞内p-Akt和P-gp的表达,增强A549/DDP对DDP的敏感性有关.
목적:연구보중익기탕함약혈청역전인폐선암순박내약세포주(A549/DDP)내순박(DDP)작용급기대린산화사안산/소안산단백격매(p-Akt)화P-당단백(P-gp)표체적영향.방법:채용혈청약이학방법제비함약혈청,수궤대조법장24지SD대서분위공백대조조(급생리염수10 mL·kg-1),보중익기탕고、중、저제량조(11.34,5.67,2.84 g·kg-1,10 mL·kg-1),매일ig급약1차,련속7d후제취혈청.장A549/DDP분위공백혈청조,보중익기탕고、중、저제량함약혈청조,조체제조,고제량함약혈청연합조체제(LY294002)조,MTT법검측각조세포대DDP적IC50,병계산내약역전배수.면역세포화학법검측각조세포중p-Akt화P-gp단백적표체;역전록-다취합매련식반응(RT-PCR)법검측각조세포중Akt화P-gp적mRNA표체.결과:여공백혈청조비교,보중익기탕중제량이상적함약혈청가명현강저A549/DDP대DDP적IC50(P＜0.05),병정농도의뢰효응,여조체제연합효과최가(P＜0.05);여A549/DDP공백혈청조상비,보중익기탕중、고제량함약혈청조,조체제조화고제량연합조체제조적p-Akt화P-gp적표체현저하강(P ＜0.01,P＜0.05),기중이고제량연합조체제조하강최다(P＜0.01);여A549/DDP공백혈청조상비,중、고제량함약혈청조,조체제조화고제량연합조체제조적P-gp적mRNA표체량도현저감소(P＜0.01,P＜0.05),중、고제량함약혈청조,고제량연합조체제조적p-Akt적mRNA표체량야현저감소(P＜0.05).결론:보중익기탕함약혈청가역전A549/DDP세포적순박내약,여LY294002연합응용효과경가,기역전궤제가능여감소세포내p-Akt화P-gp적표체,증강A549/DDP대DDP적민감성유관.