解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2014年
1期
70-73
,共4页
肝癌%有丝分裂%microRNA-100%Polo样激酶1%实时定量PCR%免疫印迹法%免疫荧光
肝癌%有絲分裂%microRNA-100%Polo樣激酶1%實時定量PCR%免疫印跡法%免疫熒光
간암%유사분렬%microRNA-100%Polo양격매1%실시정량PCR%면역인적법%면역형광
Hepatocellular carcinoma%Mitosis%MicroRNA-100%Polo-like kinase 1%Real-time quantitative PCR%Western blotting%Immunofluorescence
目的 探讨microRNA-100(miR-100)对肝癌细胞有丝分裂阻滞及Polo样激酶1(PLK1)表达的作用.方法 采用实时定量PCR和免疫荧光方法检测miR-100和PLK1在人肝癌细胞HepG2中的表达.利用Oligofectamine脂质体介导将Cy3荧光标记的miR-100模拟物瞬时转染HepG2细胞,分析细胞有丝分裂和PLK1蛋白表达情况.结果 肝癌细胞HepG2的miR-100表达量低于正常肝细胞,而PLK1 mRNA和蛋白表达却异常升高.在miR-100模拟物转染后48h,实验组细胞有丝分裂指数显著小于对照细胞,经Western blotting分析显示,实验组细胞PLK1蛋白表达水平较对照组细胞均显著减低.同时免疫细胞化学检测发现,在有丝分裂中晚期和末期位于细胞核内的PLK1蛋白基本消失.结论 miR-100具有抑制PLK1蛋白表达的作用,可引起肝癌细胞有丝分裂阻滞.
目的 探討microRNA-100(miR-100)對肝癌細胞有絲分裂阻滯及Polo樣激酶1(PLK1)錶達的作用.方法 採用實時定量PCR和免疫熒光方法檢測miR-100和PLK1在人肝癌細胞HepG2中的錶達.利用Oligofectamine脂質體介導將Cy3熒光標記的miR-100模擬物瞬時轉染HepG2細胞,分析細胞有絲分裂和PLK1蛋白錶達情況.結果 肝癌細胞HepG2的miR-100錶達量低于正常肝細胞,而PLK1 mRNA和蛋白錶達卻異常升高.在miR-100模擬物轉染後48h,實驗組細胞有絲分裂指數顯著小于對照細胞,經Western blotting分析顯示,實驗組細胞PLK1蛋白錶達水平較對照組細胞均顯著減低.同時免疫細胞化學檢測髮現,在有絲分裂中晚期和末期位于細胞覈內的PLK1蛋白基本消失.結論 miR-100具有抑製PLK1蛋白錶達的作用,可引起肝癌細胞有絲分裂阻滯.
목적 탐토microRNA-100(miR-100)대간암세포유사분렬조체급Polo양격매1(PLK1)표체적작용.방법 채용실시정량PCR화면역형광방법검측miR-100화PLK1재인간암세포HepG2중적표체.이용Oligofectamine지질체개도장Cy3형광표기적miR-100모의물순시전염HepG2세포,분석세포유사분렬화PLK1단백표체정황.결과 간암세포HepG2적miR-100표체량저우정상간세포,이PLK1 mRNA화단백표체각이상승고.재miR-100모의물전염후48h,실험조세포유사분렬지수현저소우대조세포,경Western blotting분석현시,실험조세포PLK1단백표체수평교대조조세포균현저감저.동시면역세포화학검측발현,재유사분렬중만기화말기위우세포핵내적PLK1단백기본소실.결론 miR-100구유억제PLK1단백표체적작용,가인기간암세포유사분렬조체.
