科技导报
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과기도보
SCIENCE & TECHNOLOGY REVIEW
2013年
27期
21-26
,共6页
罗居东%薜姣%葛欣%葛杨杨%曹建平%张舒羽
囉居東%薜姣%葛訢%葛楊楊%曹建平%張舒羽
라거동%벽교%갈흔%갈양양%조건평%장서우
表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)%过氧化物酶体增殖物活化受体α(PPARα)%血红素加氧酶-1(HO-1)%增敏%抗氧化
錶沒食子兒茶素沒食子痠酯(EGCG)%過氧化物酶體增殖物活化受體α(PPARα)%血紅素加氧酶-1(HO-1)%增敏%抗氧化
표몰식자인다소몰식자산지(EGCG)%과양화물매체증식물활화수체α(PPARα)%혈홍소가양매-1(HO-1)%증민%항양화
epigallocatechin-3-gallate (EGCG)%peroxisome proliferator-activated receptor alpha (PPARα)%heme oxygenases-1 (HO-1)%sensitivity%anti-oxidative
研究探索表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是否调节PPARα以及PPARα活化对EGCG的肿瘤抑制作用影响及其机制.首先利用CCK-8试剂盒检测细胞存活率,之后分别采用western blotting和reαl-time PCR检测蛋白质和mRNA表达水平;采用PPARα的特异性激动剂和特异性拮抗剂来改变PPARα的表达;应用荧光素酶报告基因系统及染色质免疫共沉淀研究PPARα对HO-1的调控.结果表明,随着EGCG浓度的增加,PANC1和A2780细胞的存活率逐渐下降.当EGCG处理肿瘤细胞后,PPARα蛋白水平会随着EGCG剂量的提高而增加.PPARα的特异性激动剂—氯贝特(clofibrate)能增加胰腺癌PANC1和卵巢癌A2780细胞对EGCG的敏感性,其机制是氯贝特能够抑制细胞保护性血红素加氧酶-1(HO-1)的诱导.荧光素酶报告基因实验和染色质免疫共沉淀实验(ChIP)表明,活化的PPARα能结合到HO-1启动子上的PPAR结合元件(PPRE)上并抑制HO-1的表达.研究表明,PPARα的活化能在转录水平对HO-1进行负调控,同时增加肿瘤细胞对EGCG的敏感性.
研究探索錶沒食子兒茶素沒食子痠酯(EGCG)是否調節PPARα以及PPARα活化對EGCG的腫瘤抑製作用影響及其機製.首先利用CCK-8試劑盒檢測細胞存活率,之後分彆採用western blotting和reαl-time PCR檢測蛋白質和mRNA錶達水平;採用PPARα的特異性激動劑和特異性拮抗劑來改變PPARα的錶達;應用熒光素酶報告基因繫統及染色質免疫共沉澱研究PPARα對HO-1的調控.結果錶明,隨著EGCG濃度的增加,PANC1和A2780細胞的存活率逐漸下降.噹EGCG處理腫瘤細胞後,PPARα蛋白水平會隨著EGCG劑量的提高而增加.PPARα的特異性激動劑—氯貝特(clofibrate)能增加胰腺癌PANC1和卵巢癌A2780細胞對EGCG的敏感性,其機製是氯貝特能夠抑製細胞保護性血紅素加氧酶-1(HO-1)的誘導.熒光素酶報告基因實驗和染色質免疫共沉澱實驗(ChIP)錶明,活化的PPARα能結閤到HO-1啟動子上的PPAR結閤元件(PPRE)上併抑製HO-1的錶達.研究錶明,PPARα的活化能在轉錄水平對HO-1進行負調控,同時增加腫瘤細胞對EGCG的敏感性.
연구탐색표몰식자인다소몰식자산지(EGCG)시부조절PPARα이급PPARα활화대EGCG적종류억제작용영향급기궤제.수선이용CCK-8시제합검측세포존활솔,지후분별채용western blotting화reαl-time PCR검측단백질화mRNA표체수평;채용PPARα적특이성격동제화특이성길항제래개변PPARα적표체;응용형광소매보고기인계통급염색질면역공침정연구PPARα대HO-1적조공.결과표명,수착EGCG농도적증가,PANC1화A2780세포적존활솔축점하강.당EGCG처리종류세포후,PPARα단백수평회수착EGCG제량적제고이증가.PPARα적특이성격동제—록패특(clofibrate)능증가이선암PANC1화란소암A2780세포대EGCG적민감성,기궤제시록패특능구억제세포보호성혈홍소가양매-1(HO-1)적유도.형광소매보고기인실험화염색질면역공침정실험(ChIP)표명,활화적PPARα능결합도HO-1계동자상적PPAR결합원건(PPRE)상병억제HO-1적표체.연구표명,PPARα적활화능재전록수평대HO-1진행부조공,동시증가종류세포대EGCG적민감성.
