中华损伤与修复杂志（电子版）
中華損傷與脩複雜誌（電子版）
중화손상여수복잡지（전자판）
Chinese Journal of Injury Repair and Wound Healing
2013年
2期
26-29
,共4页
常春娟%贾赤宇%刘真%胡永亮%胡国栋%田甜%周国勇
常春娟%賈赤宇%劉真%鬍永亮%鬍國棟%田甜%週國勇
상춘연%가적우%류진%호영량%호국동%전첨%주국용
脂肪组织%内皮细胞%细胞培养%种子细胞
脂肪組織%內皮細胞%細胞培養%種子細胞
지방조직%내피세포%세포배양%충자세포
Adipose tissue%Endothelial cells%Cells culture%Seed cells
目的 对目前常用的大鼠脂肪血管内皮细胞(VECs)的原代培养方法进行改良,建立一种操作更为简单、更经济的VECs的原代培养方法.方法 取SD大鼠睾丸囊脂肪组织,采用胶原酶消化法,在保留血管及脂肪组织、缩短消化时间的条件下分离、获取细胞,普通高糖培养基培养,光镜下观察细胞形态及生长情况,CD29、CD31与Ⅷ因子相关抗原流式鉴定及Ⅷ因子相关抗原免疫荧光鉴定,MTT比色法检测细胞冻存前后增生率,并讨论改良培养法较传统培养法的优越性.结果 体外培养的原代VECs在光镜下初始呈偏圆不规则多角形,细胞融合后呈铺路石样生长；流式鉴定CD31阳性和CD29、Ⅷ因子相关抗原弱阳性,Ⅷ因子相关抗原荧光染色阳性；细胞传至第20代后,仍未见贴壁困难、生长停滞等迹象,平均传代时间为5 ～7 d；液氮中冻存12个月复苏后细胞形态及生长情况无明显改变.结论 改良的大鼠脂肪来源VECs的分离和培养方法,较传统方法更简单、经济,培养时间更短,可长期传代,是一种较为理想的培养方法.
目的 對目前常用的大鼠脂肪血管內皮細胞(VECs)的原代培養方法進行改良,建立一種操作更為簡單、更經濟的VECs的原代培養方法.方法 取SD大鼠睪汍囊脂肪組織,採用膠原酶消化法,在保留血管及脂肪組織、縮短消化時間的條件下分離、穫取細胞,普通高糖培養基培養,光鏡下觀察細胞形態及生長情況,CD29、CD31與Ⅷ因子相關抗原流式鑒定及Ⅷ因子相關抗原免疫熒光鑒定,MTT比色法檢測細胞凍存前後增生率,併討論改良培養法較傳統培養法的優越性.結果 體外培養的原代VECs在光鏡下初始呈偏圓不規則多角形,細胞融閤後呈鋪路石樣生長；流式鑒定CD31暘性和CD29、Ⅷ因子相關抗原弱暘性,Ⅷ因子相關抗原熒光染色暘性；細胞傳至第20代後,仍未見貼壁睏難、生長停滯等跡象,平均傳代時間為5 ～7 d；液氮中凍存12箇月複囌後細胞形態及生長情況無明顯改變.結論 改良的大鼠脂肪來源VECs的分離和培養方法,較傳統方法更簡單、經濟,培養時間更短,可長期傳代,是一種較為理想的培養方法.
목적 대목전상용적대서지방혈관내피세포(VECs)적원대배양방법진행개량,건립일충조작경위간단、경경제적VECs적원대배양방법.방법 취SD대서고환낭지방조직,채용효원매소화법,재보류혈관급지방조직、축단소화시간적조건하분리、획취세포,보통고당배양기배양,광경하관찰세포형태급생장정황,CD29、CD31여Ⅷ인자상관항원류식감정급Ⅷ인자상관항원면역형광감정,MTT비색법검측세포동존전후증생솔,병토론개량배양법교전통배양법적우월성.결과 체외배양적원대VECs재광경하초시정편원불규칙다각형,세포융합후정포로석양생장；류식감정CD31양성화CD29、Ⅷ인자상관항원약양성,Ⅷ인자상관항원형광염색양성；세포전지제20대후,잉미견첩벽곤난、생장정체등적상,평균전대시간위5 ～7 d；액담중동존12개월복소후세포형태급생장정황무명현개변.결론 개량적대서지방래원VECs적분리화배양방법,교전통방법경간단、경제,배양시간경단,가장기전대,시일충교위이상적배양방법.
