江苏农业学报
江囌農業學報
강소농업학보
JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
4期
842-850
,共9页
李慧%丛郁%常有宏%蔺经%盛宝龙
李慧%叢鬱%常有宏%藺經%盛寶龍
리혜%총욱%상유굉%린경%성보룡
豆梨%磷转运蛋白质基因%分离%启动子%表达
豆梨%燐轉運蛋白質基因%分離%啟動子%錶達
두리%린전운단백질기인%분리%계동자%표체
Pyrus calleryana Dcne.%phosphate transport protein gene%isolation%expression%promoter
为明确梨砧木豆梨(Pyrus calleryana Dcne.)磷转运蛋白质基因的序列特点和表达模式,采用同源克隆、RACE技术和染色体步移法克隆获得1个Pht基因PcPht1的cDNA、DNA及启动子序列,并利用RT-PCR检测在不同供磷水平下该基因在豆梨幼苗中的表达情况.结果表明PcPht1 cDNA序列编码区长1 617 bp,编码1个由538个氨基酸组成的蛋白质,其相对分子质量为5.908× 104.该基因编码区DNA序列没有内含子,其启动子除了具有TATA/CAAT-box外还包含防御与胁迫响应元件、光响应元件和茉莉酸甲酯响应顺式作用元件.PcPht1所编码蛋白质由12个疏水的跨膜区域组成,包括H2PO4-/nH+共运体、糖转运体和MFS通用底物转运体3个Pht1蛋白质特征结构域.PcPht1与大豆GmPht1;07和橡胶HbPht1间有较高的一致性(分别为88.0％和87.0％);与拟南芥Pht1蛋白质家族处于系统进化树的同一分支,并与AtPht1;4和AtPht1;7的亲缘关系最近.正常供磷条件下,PcPht1基因主要在根中表达,低磷时该基因的表达上调,提高供磷浓度其表达受到抑制,说明PcPht1的表达受环境磷浓度调控.
為明確梨砧木豆梨(Pyrus calleryana Dcne.)燐轉運蛋白質基因的序列特點和錶達模式,採用同源剋隆、RACE技術和染色體步移法剋隆穫得1箇Pht基因PcPht1的cDNA、DNA及啟動子序列,併利用RT-PCR檢測在不同供燐水平下該基因在豆梨幼苗中的錶達情況.結果錶明PcPht1 cDNA序列編碼區長1 617 bp,編碼1箇由538箇氨基痠組成的蛋白質,其相對分子質量為5.908× 104.該基因編碼區DNA序列沒有內含子,其啟動子除瞭具有TATA/CAAT-box外還包含防禦與脅迫響應元件、光響應元件和茉莉痠甲酯響應順式作用元件.PcPht1所編碼蛋白質由12箇疏水的跨膜區域組成,包括H2PO4-/nH+共運體、糖轉運體和MFS通用底物轉運體3箇Pht1蛋白質特徵結構域.PcPht1與大豆GmPht1;07和橡膠HbPht1間有較高的一緻性(分彆為88.0％和87.0％);與擬南芥Pht1蛋白質傢族處于繫統進化樹的同一分支,併與AtPht1;4和AtPht1;7的親緣關繫最近.正常供燐條件下,PcPht1基因主要在根中錶達,低燐時該基因的錶達上調,提高供燐濃度其錶達受到抑製,說明PcPht1的錶達受環境燐濃度調控.
위명학리침목두리(Pyrus calleryana Dcne.)린전운단백질기인적서렬특점화표체모식,채용동원극륭、RACE기술화염색체보이법극륭획득1개Pht기인PcPht1적cDNA、DNA급계동자서렬,병이용RT-PCR검측재불동공린수평하해기인재두리유묘중적표체정황.결과표명PcPht1 cDNA서렬편마구장1 617 bp,편마1개유538개안기산조성적단백질,기상대분자질량위5.908× 104.해기인편마구DNA서렬몰유내함자,기계동자제료구유TATA/CAAT-box외환포함방어여협박향응원건、광향응원건화말리산갑지향응순식작용원건.PcPht1소편마단백질유12개소수적과막구역조성,포괄H2PO4-/nH+공운체、당전운체화MFS통용저물전운체3개Pht1단백질특정결구역.PcPht1여대두GmPht1;07화상효HbPht1간유교고적일치성(분별위88.0％화87.0％);여의남개Pht1단백질가족처우계통진화수적동일분지,병여AtPht1;4화AtPht1;7적친연관계최근.정상공린조건하,PcPht1기인주요재근중표체,저린시해기인적표체상조,제고공린농도기표체수도억제,설명PcPht1적표체수배경린농도조공.
