复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2013年
5期
550-555
,共6页
李俊%王建中%白广平%周雷%黄新生
李俊%王建中%白廣平%週雷%黃新生
리준%왕건중%백엄평%주뢰%황신생
慢病毒载体%喉癌%RNA干扰%微小RNA-197
慢病毒載體%喉癌%RNA榦擾%微小RNA-197
만병독재체%후암%RNA간우%미소RNA-197
lentiviral vector%laryngeal carcinoma%RNA interference%miRNA-197
目的 通过构建慢病毒介导(lentivirus,LV)的miRNA-197-3 p-siRNA,探讨下调miRNA-197-3p对喉癌细胞系Hep-2生物学行为的影响.方法 针对目标序列合成特异性siRNA干扰片段并克隆入慢病毒载体,将重组miRNA-197-3 p-RNAi-LV3转染喉鳞状细胞癌Hep-2.Hep-2细胞设为干扰组(miRNA-197-3p-siRNA,MI组)、阴性对照组(negative control,NC组)和空白对照组(blank,B组);分别采用聚合酶链反应方法检测miRNA-197-3p的表达情况;用CCK8法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭情况.结果 miRNA-197-3 p-RNAi-LV3可显著降低miRNA-197-3p的表达.CCK8实验显示细胞增殖能力显著降低(P＜0.05).Transwell实验显示细胞侵袭能力明显减弱(P＜0.05).流式细胞仪检测表明转染后对Hep-2细胞周期及细胞凋亡均无明显影响(P＞0.05).结论 miRNA-197-3p-siRNA通过下调miRNA-197-3p的表达,可以抑制Hep-2细胞增殖,并降低其侵袭能力.
目的 通過構建慢病毒介導(lentivirus,LV)的miRNA-197-3 p-siRNA,探討下調miRNA-197-3p對喉癌細胞繫Hep-2生物學行為的影響.方法 針對目標序列閤成特異性siRNA榦擾片段併剋隆入慢病毒載體,將重組miRNA-197-3 p-RNAi-LV3轉染喉鱗狀細胞癌Hep-2.Hep-2細胞設為榦擾組(miRNA-197-3p-siRNA,MI組)、陰性對照組(negative control,NC組)和空白對照組(blank,B組);分彆採用聚閤酶鏈反應方法檢測miRNA-197-3p的錶達情況;用CCK8法檢測細胞增殖情況,流式細胞儀檢測細胞週期及凋亡情況,Transwell侵襲實驗檢測細胞侵襲情況.結果 miRNA-197-3 p-RNAi-LV3可顯著降低miRNA-197-3p的錶達.CCK8實驗顯示細胞增殖能力顯著降低(P＜0.05).Transwell實驗顯示細胞侵襲能力明顯減弱(P＜0.05).流式細胞儀檢測錶明轉染後對Hep-2細胞週期及細胞凋亡均無明顯影響(P＞0.05).結論 miRNA-197-3p-siRNA通過下調miRNA-197-3p的錶達,可以抑製Hep-2細胞增殖,併降低其侵襲能力.
목적 통과구건만병독개도(lentivirus,LV)적miRNA-197-3 p-siRNA,탐토하조miRNA-197-3p대후암세포계Hep-2생물학행위적영향.방법 침대목표서렬합성특이성siRNA간우편단병극륭입만병독재체,장중조miRNA-197-3 p-RNAi-LV3전염후린상세포암Hep-2.Hep-2세포설위간우조(miRNA-197-3p-siRNA,MI조)、음성대조조(negative control,NC조)화공백대조조(blank,B조);분별채용취합매련반응방법검측miRNA-197-3p적표체정황;용CCK8법검측세포증식정황,류식세포의검측세포주기급조망정황,Transwell침습실험검측세포침습정황.결과 miRNA-197-3 p-RNAi-LV3가현저강저miRNA-197-3p적표체.CCK8실험현시세포증식능력현저강저(P＜0.05).Transwell실험현시세포침습능력명현감약(P＜0.05).류식세포의검측표명전염후대Hep-2세포주기급세포조망균무명현영향(P＞0.05).결론 miRNA-197-3p-siRNA통과하조miRNA-197-3p적표체,가이억제Hep-2세포증식,병강저기침습능력.
