河北大学学报（自然科学版）
河北大學學報（自然科學版）
하북대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF HEBEI UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2013年
5期
489-495
,共7页
8-氨基1,3,6-萘三磺酸%二氧化钛%N-连接糖基化%富集
8-氨基1,3,6-萘三磺痠%二氧化鈦%N-連接糖基化%富集
8-안기1,3,6-내삼광산%이양화태%N-련접당기화%부집
8-aminonaphthalene-1,3,6-trisulfonic acid%titanium dioxide%N-linked glycosylation%enrichment
发展了基于双功能荧光标签8-氨基1,3,6-萘三磺酸(ANTS)选择性糖基化蛋白质标记和二氧化钛(TiO2)亲和富集的N-连接糖基化富集新方法.模式蛋白质细胞色素c、肌红蛋白、核糖核酸酶b、抗生素和α-l-抗胰蛋白酶经ANTS标记后,所有糖基化蛋白质均发出亮绿色荧光,而非糖基化蛋白质则不能观测到荧光；进一步采用TiO2对酶切产生的N-连接糖基化肽段进行富集,同时实现了中性糖肽和唾液酸糖肤的选择性富集.通过进一步分析人血清N-连接糖基化蛋白质,共鉴定到39个唯一的N-连接糖蛋白,包括了53个唯一的N-连接糖基化位点；此外,该方法与采用TiO2法直接富集以及肼化学法富集鉴定到的交叠糖基化位点数均小于40％,说明这一新方法与传统方法在糖基化肽段富集方面具有一定的互补性,有望用于复杂蛋白质样品的N-连接糖基化高效富集.
髮展瞭基于雙功能熒光標籤8-氨基1,3,6-萘三磺痠(ANTS)選擇性糖基化蛋白質標記和二氧化鈦(TiO2)親和富集的N-連接糖基化富集新方法.模式蛋白質細胞色素c、肌紅蛋白、覈糖覈痠酶b、抗生素和α-l-抗胰蛋白酶經ANTS標記後,所有糖基化蛋白質均髮齣亮綠色熒光,而非糖基化蛋白質則不能觀測到熒光；進一步採用TiO2對酶切產生的N-連接糖基化肽段進行富集,同時實現瞭中性糖肽和唾液痠糖膚的選擇性富集.通過進一步分析人血清N-連接糖基化蛋白質,共鑒定到39箇唯一的N-連接糖蛋白,包括瞭53箇唯一的N-連接糖基化位點；此外,該方法與採用TiO2法直接富集以及肼化學法富集鑒定到的交疊糖基化位點數均小于40％,說明這一新方法與傳統方法在糖基化肽段富集方麵具有一定的互補性,有望用于複雜蛋白質樣品的N-連接糖基化高效富集.
발전료기우쌍공능형광표첨8-안기1,3,6-내삼광산(ANTS)선택성당기화단백질표기화이양화태(TiO2)친화부집적N-련접당기화부집신방법.모식단백질세포색소c、기홍단백、핵당핵산매b、항생소화α-l-항이단백매경ANTS표기후,소유당기화단백질균발출량록색형광,이비당기화단백질칙불능관측도형광；진일보채용TiO2대매절산생적N-련접당기화태단진행부집,동시실현료중성당태화타액산당부적선택성부집.통과진일보분석인혈청N-련접당기화단백질,공감정도39개유일적N-련접당단백,포괄료53개유일적N-련접당기화위점；차외,해방법여채용TiO2법직접부집이급정화학법부집감정도적교첩당기화위점수균소우40％,설명저일신방법여전통방법재당기화태단부집방면구유일정적호보성,유망용우복잡단백질양품적N-련접당기화고효부집.
