牛α干扰素在毕赤酵母中的高效分泌表达及活性鉴定
우α간우소재필적효모중적고효분비표체급활성감정
High-level secretory expression of bovine alpha interferon in Pichia pastoris
  • 万方数据
    中国预防兽医学报 중국예방수의학보
    CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
    2013年 10期 845-848 ,共4页

    王延群%张璐%李玉明%汪志艳%金家民%刘永刚%王刚%王淑杰%姜成刚

    왕연군%장로%리옥명%왕지염%금가민%류영강%왕강%왕숙걸%강성강

    牛IFN-α%毕赤酵母%分泌表达 牛IFN-α%畢赤酵母%分泌錶達
    우IFN-α%필적효모%분비표체
    bovine IFN-α%Pichia pastoris%secretory expression
    为高效分泌表达牛α干扰素(boIFN-α),本研究通过人工合成boIFN-α基因,将目的基因克隆至表达载体pPIC9K中,构建重组质粒pPIC9K-boIFN-α,将其电转化于毕赤酵母菌株GS115,利用抗药选择压力G418筛选重组菌,对重组菌诱导表达,取上清进行SDS-PAGE和western blot检测,并优化重组菌的诱导表达条件.结果显示:筛选获得高效分泌表达boIFN-α的重组菌,其最佳诱导条件为:250 r/min,26℃培养,1％甲醇浓度诱导,诱导72 h.上清中目的蛋白表达量最高可达200 μg/mL,本研究为boIFN-α在生产中的应用奠定了基础.
    위고효분비표체우α간우소(boIFN-α),본연구통과인공합성boIFN-α기인,장목적기인극륭지표체재체pPIC9K중,구건중조질립pPIC9K-boIFN-α,장기전전화우필적효모균주GS115,이용항약선택압력G418사선중조균,대중조균유도표체,취상청진행SDS-PAGE화western blot검측,병우화중조균적유도표체조건.결과현시:사선획득고효분비표체boIFN-α적중조균,기최가유도조건위:250 r/min,26℃배양,1％갑순농도유도,유도72 h.상청중목적단백표체량최고가체200 μg/mL,본연구위boIFN-α재생산중적응용전정료기출.
    원문보기 원문다운로드 사이트로이동
저자의 최근 논문