CAJ | 학술논문

为建立快速检测猪鼻支原体(M.hyorhinis)的荧光定量PCR方法,本研究根据GenBank中登录的p37基因序列设计并合成引物及MGB探针,构建含有p37基因的重组质粒,以其为标准品绘制标准曲线,并检测该方法的特异性、敏感性和重复性.结果显示该方法具有良好的特异性,与猪肺炎支原体、猪絮状支原体、猪滑液支原体、鸡毒支原体、副猪嗜血杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、猪圆环病毒、猪瘟病毒及猪流感病毒无交叉反应,对M.hyorhinis的检测敏感性为10拷贝/μL,并且稳定性好,变异系数小于2％.利用建立的荧光定量PCR方法对55份临床样品进行检测,阳性检出率为87.3％(48/55),而分离培养方法和普通PCR的阳性检出率分别为41.8％(23/55)和29.1％ (16/55).该结果表明,建立的方法特异性强、敏感性高、稳定性好,可以用于M.hyorhinis临床样品的检测,对M.hyorhinis的快速和定量检测具有重要意义.
위건립쾌속검측저비지원체(M.hyorhinis)적형광정량PCR방법,본연구근거GenBank중등록적p37기인서렬설계병합성인물급MGB탐침,구건함유p37기인적중조질립,이기위표준품회제표준곡선,병검측해방법적특이성、민감성화중복성.결과현시해방법구유량호적특이성,여저폐염지원체、저서상지원체、저활액지원체、계독지원체、부저기혈간균、저흉막폐염방선간균、저원배병독、저온병독급저류감병독무교차반응,대M.hyorhinis적검측민감성위10고패/μL,병차은정성호,변이계수소우2％.이용건립적형광정량PCR방법대55빈림상양품진행검측,양성검출솔위87.3％(48/55),이분리배양방법화보통PCR적양성검출솔분별위41.8％(23/55)화29.1％ (16/55).해결과표명,건립적방법특이성강、민감성고、은정성호,가이용우M.hyorhinis림상양품적검측,대M.hyorhinis적쾌속화정량검측구유중요의의.