南方农业学报
南方農業學報
남방농업학보
GUANGXI AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
9期
1547-1551
,共5页
梁明明%权利%黄高波%孙如玉%许惠艳%卢晟盛
樑明明%權利%黃高波%孫如玉%許惠豔%盧晟盛
량명명%권리%황고파%손여옥%허혜염%로성성
食蟹猴%猪%异种核移植%胚胎发育
食蟹猴%豬%異種覈移植%胚胎髮育
식해후%저%이충핵이식%배태발육
cynomolgus monkey%pig%iSCNT(inter-species nuclear transplantation)%embryo development
[目的]探索食蟹猴—猪异种核移植胚胎的发育能力,为食蟹猴异种核移植胚胎干细胞的构建奠定基础.[方法]以食蟹猴和猪胎儿的耳部成纤维细胞为供体,猪MⅡ期去核卵母细胞为受体,构建异种核移植重构胚,并从核移植融合/激活方式、培养液两个方面进行优化.[结果]70枚食蟹猴—猪异种核移植胚胎中,有49枚分裂(70.0％),与猪同种核移植胚胎的分裂率(76.6％)无显著差异;使用微卫星引物D15S823对食蟹猴—猪异种核移植胚胎进行遗传学鉴定,均能扩增获得D15S823条带(350 bp);食蟹猴—猪异种核移植胚胎融合后1h的染色体早熟凝集率(24.2％)显著低于猪同种核移植胚胎(44.7％)和猪孤雌激活胚胎(100.0％),通过使用无Ca2+融合液能够显著提高染色体早熟凝集率(48.2％);在PZM-3、HECM-10和HECM-10+10％ FBS 3种培养液中,食蟹猴—猪异种核移植胚胎的分裂率无显著差异.[结论]食蟹猴体细胞核能够在猪MⅡ期去核卵母细胞胞质中发生核重塑,并发育到8-细胞阶段.
[目的]探索食蟹猴—豬異種覈移植胚胎的髮育能力,為食蟹猴異種覈移植胚胎榦細胞的構建奠定基礎.[方法]以食蟹猴和豬胎兒的耳部成纖維細胞為供體,豬MⅡ期去覈卵母細胞為受體,構建異種覈移植重構胚,併從覈移植融閤/激活方式、培養液兩箇方麵進行優化.[結果]70枚食蟹猴—豬異種覈移植胚胎中,有49枚分裂(70.0％),與豬同種覈移植胚胎的分裂率(76.6％)無顯著差異;使用微衛星引物D15S823對食蟹猴—豬異種覈移植胚胎進行遺傳學鑒定,均能擴增穫得D15S823條帶(350 bp);食蟹猴—豬異種覈移植胚胎融閤後1h的染色體早熟凝集率(24.2％)顯著低于豬同種覈移植胚胎(44.7％)和豬孤雌激活胚胎(100.0％),通過使用無Ca2+融閤液能夠顯著提高染色體早熟凝集率(48.2％);在PZM-3、HECM-10和HECM-10+10％ FBS 3種培養液中,食蟹猴—豬異種覈移植胚胎的分裂率無顯著差異.[結論]食蟹猴體細胞覈能夠在豬MⅡ期去覈卵母細胞胞質中髮生覈重塑,併髮育到8-細胞階段.
[목적]탐색식해후—저이충핵이식배태적발육능력,위식해후이충핵이식배태간세포적구건전정기출.[방법]이식해후화저태인적이부성섬유세포위공체,저MⅡ기거핵란모세포위수체,구건이충핵이식중구배,병종핵이식융합/격활방식、배양액량개방면진행우화.[결과]70매식해후—저이충핵이식배태중,유49매분렬(70.0％),여저동충핵이식배태적분렬솔(76.6％)무현저차이;사용미위성인물D15S823대식해후—저이충핵이식배태진행유전학감정,균능확증획득D15S823조대(350 bp);식해후—저이충핵이식배태융합후1h적염색체조숙응집솔(24.2％)현저저우저동충핵이식배태(44.7％)화저고자격활배태(100.0％),통과사용무Ca2+융합액능구현저제고염색체조숙응집솔(48.2％);재PZM-3、HECM-10화HECM-10+10％ FBS 3충배양액중,식해후—저이충핵이식배태적분렬솔무현저차이.[결론]식해후체세포핵능구재저MⅡ기거핵란모세포포질중발생핵중소,병발육도8-세포계단.
