CAJ | 학술논문

[目的]研究物理与化学因子对白芸豆凝集素生物学活性的影响,为白芸豆凝集素开发利用奠定理论基础和提供技术参考.[方法]白芸豆(Phaseolus vulgarisL)种子经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换和Sephadex G-100凝胶柱层析得到凝集素(PVL);然后以不同温度和pH梯度、不同金属离子、不同变性剂处理样品,通过倍比稀释法测定凝集素的生物学活性.[结果]白芸豆凝集素能使兔血红细胞发生凝集,在20～70℃红细胞凝集活性不受影响,当温度达到80℃时凝集素样品仅有25％凝血活性,85℃加热30 min凝血活性全部消失.用EDTA溶液处理后,白芸豆凝集素失去凝血活性,金属离子Mg2+和K+能恢复凝血活性,Mn2+能完全恢复凝血活性,Ba2+、Cu2+、Fe3+、Ca2+不能使凝血活性恢复.白芸豆凝集素在缓冲液pH低于4.0时凝血活性逐步降低,在pH 3.0时,活性仅有45％;在缓冲液pH高于7.2时活性逐步降低,pH 9.0时凝血活性仅有44％.3种变性剂变性试验中,脲能使凝集素凝血活性降低70％,盐酸胍能降低30％,SDS能降低18％.[结论]白芸豆凝集素具很强的热稳定性和广谱酸碱度适应能力;凝血活性依赖Mn2+等金属离子,且仅能被变性剂6 mol/L脲部分抑制.在实际应用中,可根据适宜条件控制其物理和化学因素,防止凝集素变性失活.
[목적]연구물리여화학인자대백예두응집소생물학활성적영향,위백예두응집소개발이용전정이론기출화제공기술삼고.[방법]백예두(Phaseolus vulgarisL)충자경류산안분급침정、DEAE-Sepharose리자교환화Sephadex G-100응효주층석득도응집소(PVL);연후이불동온도화pH제도、불동금속리자、불동변성제처리양품,통과배비희석법측정응집소적생물학활성.[결과]백예두응집소능사토혈홍세포발생응집,재20～70℃홍세포응집활성불수영향,당온도체도80℃시응집소양품부유25％응혈활성,85℃가열30 min응혈활성전부소실.용EDTA용액처리후,백예두응집소실거응혈활성,금속리자Mg2+화K+능회복응혈활성,Mn2+능완전회복응혈활성,Ba2+、Cu2+、Fe3+、Ca2+불능사응혈활성회복.백예두응집소재완충액pH저우4.0시응혈활성축보강저,재pH 3.0시,활성부유45％;재완충액pH고우7.2시활성축보강저,pH 9.0시응혈활성부유44％.3충변성제변성시험중,뇨능사응집소응혈활성강저70％,염산고능강저30％,SDS능강저18％.[결론]백예두응집소구흔강적열은정성화엄보산감도괄응능력;응혈활성의뢰Mn2+등금속리자,차부능피변성제6 mol/L뇨부분억제.재실제응용중,가근거괄의조건공제기물리화화학인소,방지응집소변성실활.