中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2014年
5期
376-378
,共3页
吴洋%杜彩虹%张博%唐丽杰%乔薪瑗%姜艳平%李一经
吳洋%杜綵虹%張博%唐麗傑%喬薪瑗%薑豔平%李一經
오양%두채홍%장박%당려걸%교신원%강염평%리일경
多重聚合酶链式反应%猪流行性腹泻病毒%猪传染性胃肠炎病毒%猪轮状病毒
多重聚閤酶鏈式反應%豬流行性腹瀉病毒%豬傳染性胃腸炎病毒%豬輪狀病毒
다중취합매련식반응%저류행성복사병독%저전염성위장염병독%저륜상병독
multiple RT-PCR%porcine epidemic diarrhea virus%porcine transmissible gastroenteritis virus%porcine rotavirus
为建立同时检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(PRV)的多重RT-PCR检测方法,本研究根据GenBank中登录的PEDV S基因、TGEV S基因和PRV VP6基因序列设计合成引物,利用这3对引物对同一样品中的PEDV、TGEV、PRV进行多重RT-PCR扩增,结果显示,该方法可以同时扩增PEDV (682 bp)、TGEV (480 bp)和PRV (297 bp)的特异性DNA片段,而对猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒的PCR扩增结果均为阴性;敏感性试验结果表明,该多重RT-PCR方法对PEDV、TGEV和PRV的最低检出量分别为3.3×103拷贝/μL、3.2×103拷贝/μL和2.8×103拷贝/μL.利用建立的多重RT-PCR检测方法和单项RT-PCR对20份临床病料进行检测,结果显示,两者的总符合率为100％.结果表明建立的多重RT-PCR检测方法具有特异、快速、准确的特点,可以用于这3种病毒的同时检测和疾病的鉴别诊断.
為建立同時檢測豬流行性腹瀉病毒(PEDV)、豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)和豬輪狀病毒(PRV)的多重RT-PCR檢測方法,本研究根據GenBank中登錄的PEDV S基因、TGEV S基因和PRV VP6基因序列設計閤成引物,利用這3對引物對同一樣品中的PEDV、TGEV、PRV進行多重RT-PCR擴增,結果顯示,該方法可以同時擴增PEDV (682 bp)、TGEV (480 bp)和PRV (297 bp)的特異性DNA片段,而對豬瘟病毒和豬偽狂犬病毒的PCR擴增結果均為陰性;敏感性試驗結果錶明,該多重RT-PCR方法對PEDV、TGEV和PRV的最低檢齣量分彆為3.3×103拷貝/μL、3.2×103拷貝/μL和2.8×103拷貝/μL.利用建立的多重RT-PCR檢測方法和單項RT-PCR對20份臨床病料進行檢測,結果顯示,兩者的總符閤率為100％.結果錶明建立的多重RT-PCR檢測方法具有特異、快速、準確的特點,可以用于這3種病毒的同時檢測和疾病的鑒彆診斷.
위건립동시검측저류행성복사병독(PEDV)、저전염성위장염병독(TGEV)화저륜상병독(PRV)적다중RT-PCR검측방법,본연구근거GenBank중등록적PEDV S기인、TGEV S기인화PRV VP6기인서렬설계합성인물,이용저3대인물대동일양품중적PEDV、TGEV、PRV진행다중RT-PCR확증,결과현시,해방법가이동시확증PEDV (682 bp)、TGEV (480 bp)화PRV (297 bp)적특이성DNA편단,이대저온병독화저위광견병독적PCR확증결과균위음성;민감성시험결과표명,해다중RT-PCR방법대PEDV、TGEV화PRV적최저검출량분별위3.3×103고패/μL、3.2×103고패/μL화2.8×103고패/μL.이용건립적다중RT-PCR검측방법화단항RT-PCR대20빈림상병료진행검측,결과현시,량자적총부합솔위100％.결과표명건립적다중RT-PCR검측방법구유특이、쾌속、준학적특점,가이용우저3충병독적동시검측화질병적감별진단.
