猪流感病毒核酸检测装甲RNA质控样品的研制
저류감병독핵산검측장갑RNA질공양품적연제
Preparation of armored RNA as reference controls for nucleic acid test of swine influenza virus
  • 万方数据
    中国预防兽医学报 중국예방수의학보
    CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
    2014年 5期 371-375 ,共5页

    乔彩霞%高志强%蒲静%汪琳%刘环%张利峰%张鹤晓%刘金华

    교채하%고지강%포정%왕림%류배%장리봉%장학효%류금화

    猪流感病毒%核酸检测%装甲RNA%质控样品 豬流感病毒%覈痠檢測%裝甲RNA%質控樣品
    저류감병독%핵산검측%장갑RNA%질공양품
    swine influenza virus%nucleic acid test%armored RNA%reference control
    为研制一种可以应用于猪流感病毒(SIV)核酸检测的质控品,本研究选取MS2噬菌体装甲RNA(Armored RNA)作为RNA病毒核酸检测质控样品,将MS2噬菌体成熟酶蛋白基因、衣壳蛋白基因、包装位点及SIV M基因克隆于表达载体pET-32a中,经原核表达后,利用Cellufine sulfate层析柱纯化,RT-PCR和实时荧光RT-PCR鉴定表明制备的装甲RNA (AR-SIVM)病毒样颗粒中包装有SIV M基因.稳定性研究显示,AR-SIVM可以耐受RNase的降解,并且在-20℃和4℃至少可以保存3个月.试验结果表明,AR-SIVM作为SIV核酸检测质控样品,能够实现对检测全过程(核酸提取、反转录和PCR)的质量控制.
    위연제일충가이응용우저류감병독(SIV)핵산검측적질공품,본연구선취MS2서균체장갑RNA(Armored RNA)작위RNA병독핵산검측질공양품,장MS2서균체성숙매단백기인、의각단백기인、포장위점급SIV M기인극륭우표체재체pET-32a중,경원핵표체후,이용Cellufine sulfate층석주순화,RT-PCR화실시형광RT-PCR감정표명제비적장갑RNA (AR-SIVM)병독양과립중포장유SIV M기인.은정성연구현시,AR-SIVM가이내수RNase적강해,병차재-20℃화4℃지소가이보존3개월.시험결과표명,AR-SIVM작위SIV핵산검측질공양품,능구실현대검측전과정(핵산제취、반전록화PCR)적질량공제.
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