中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2014年
5期
383-386
,共4页
王斌%刘培欣%李涛%王高玲%修金生%胡崇伟%刘恒贵
王斌%劉培訢%李濤%王高玲%脩金生%鬍崇偉%劉恆貴
왕빈%류배흔%리도%왕고령%수금생%호숭위%류항귀
单链抗体%新城疫病毒%血凝素-神经氨酸酶
單鏈抗體%新城疫病毒%血凝素-神經氨痠酶
단련항체%신성역병독%혈응소-신경안산매
single-chain antibody%Newcastle disease virus%HN
为制备抗鸡新城疫病毒(NDV)血凝素-神经氨酸酶(HN)单链抗体(scFv)并鉴定其生物学功能,本研究提取抗NDV HN单克隆抗体杂交瘤细胞株总RNA,通过RT-PCR扩增抗HN蛋白抗体的轻链可变区(VL)和重链可变区(VH)编码序列,将其插入含有Linker序列的载体pET-scIG中,构建抗HN的scFv (HN-scFv)原核表达重组质粒pET-HN-scFv并在大肠杆菌中诱导表达.结果显示HN-scFv主要以包涵体形式存在.将包涵体进行复性和Ni-NTA层析柱纯化后用于流式细胞仪检测,结果显示复性纯化后的HN-scFv能够识别表达于293T细胞表面的NDV HN蛋白.该scFv的制备为进一步对该抗体进行改造奠定了基础.
為製備抗鷄新城疫病毒(NDV)血凝素-神經氨痠酶(HN)單鏈抗體(scFv)併鑒定其生物學功能,本研究提取抗NDV HN單剋隆抗體雜交瘤細胞株總RNA,通過RT-PCR擴增抗HN蛋白抗體的輕鏈可變區(VL)和重鏈可變區(VH)編碼序列,將其插入含有Linker序列的載體pET-scIG中,構建抗HN的scFv (HN-scFv)原覈錶達重組質粒pET-HN-scFv併在大腸桿菌中誘導錶達.結果顯示HN-scFv主要以包涵體形式存在.將包涵體進行複性和Ni-NTA層析柱純化後用于流式細胞儀檢測,結果顯示複性純化後的HN-scFv能夠識彆錶達于293T細胞錶麵的NDV HN蛋白.該scFv的製備為進一步對該抗體進行改造奠定瞭基礎.
위제비항계신성역병독(NDV)혈응소-신경안산매(HN)단련항체(scFv)병감정기생물학공능,본연구제취항NDV HN단극륭항체잡교류세포주총RNA,통과RT-PCR확증항HN단백항체적경련가변구(VL)화중련가변구(VH)편마서렬,장기삽입함유Linker서렬적재체pET-scIG중,구건항HN적scFv (HN-scFv)원핵표체중조질립pET-HN-scFv병재대장간균중유도표체.결과현시HN-scFv주요이포함체형식존재.장포함체진행복성화Ni-NTA층석주순화후용우류식세포의검측,결과현시복성순화후적HN-scFv능구식별표체우293T세포표면적NDV HN단백.해scFv적제비위진일보대해항체진행개조전정료기출.
