宁夏医科大学学报
寧夏醫科大學學報
저하의과대학학보
JOURNAL OF NINGXIA MEDICAL COLLEGE
2014年
3期
252-255,封3
,共5页
尹磊%王成泉%王珺%夏鹤春
尹磊%王成泉%王珺%夏鶴春
윤뢰%왕성천%왕군%하학춘
Period2基因%shRNA%U343细胞%慢病毒
Period2基因%shRNA%U343細胞%慢病毒
Period2기인%shRNA%U343세포%만병독
Per2 gene%shRNA%U343 cells%lentiviral
目的 构建人Period2(Per2)基因shRNA慢病毒.方法 设计并合成3对特异性人Per2基因shRNA靶序列,构建到pENTRTM/U6 (GV112)慢病毒载体中,包装慢病毒,用real-time PCR筛选取最佳片段.对感染的U343细胞,经嘌呤霉素初步筛选,Western blot鉴定Per2蛋白表达,得到Per2低表达的细胞.结果 成功构建了具有Per2沉默效应的shRNA慢病毒.结论 此次包装的慢病毒可以成功抑制Per2基因在胶质瘤U343细胞中的表达,并可用嘌呤霉素筛选低表达细胞株.
目的 構建人Period2(Per2)基因shRNA慢病毒.方法 設計併閤成3對特異性人Per2基因shRNA靶序列,構建到pENTRTM/U6 (GV112)慢病毒載體中,包裝慢病毒,用real-time PCR篩選取最佳片段.對感染的U343細胞,經嘌呤黴素初步篩選,Western blot鑒定Per2蛋白錶達,得到Per2低錶達的細胞.結果 成功構建瞭具有Per2沉默效應的shRNA慢病毒.結論 此次包裝的慢病毒可以成功抑製Per2基因在膠質瘤U343細胞中的錶達,併可用嘌呤黴素篩選低錶達細胞株.
목적 구건인Period2(Per2)기인shRNA만병독.방법 설계병합성3대특이성인Per2기인shRNA파서렬,구건도pENTRTM/U6 (GV112)만병독재체중,포장만병독,용real-time PCR사선취최가편단.대감염적U343세포,경표령매소초보사선,Western blot감정Per2단백표체,득도Per2저표체적세포.결과 성공구건료구유Per2침묵효응적shRNA만병독.결론 차차포장적만병독가이성공억제Per2기인재효질류U343세포중적표체,병가용표령매소사선저표체세포주.