上海交通大学学报（农业科学版）
上海交通大學學報（農業科學版）
상해교통대학학보（농업과학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(AGRICULTURAL SCIENCE)
2014年
3期
89-94
,共6页
任国良%杨绪勤%何欢乐%蔡润%潘俊松
任國良%楊緒勤%何歡樂%蔡潤%潘俊鬆
임국량%양서근%하환악%채윤%반준송
黄瓜%果瘤基因%载体构建%遗传转化
黃瓜%果瘤基因%載體構建%遺傳轉化
황과%과류기인%재체구건%유전전화
cucumber%tubercnlate fruit gene Tu%vector construction%genetic transformation
为了进一步优化黄瓜遗传转化体系,提高遗传转化效率,构建含有自身启动子的黄瓜果瘤基因(T“)表达载体pCAMBIA2301-Tu,将表达载体通过电击法导入农杆菌菌株GV3101中,进行农杆菌介导的黄瓜遗传转化的研究.使用限制性内切酶K pnI和BamHI对质粒pCAMBIA2301和Tu基因PCR产物进行双酶切,回收目的片段,连接后成功构建Tu基因表达载体.通过优化遗传转化的生根条件以及抑制农杆菌生长条件,一定程度上提高了遗传转化的效率.580个外植体通过抗生素筛选获得的18株再生苗进行PCR检测和测序鉴定,最终获得8株阳性转化苗,转化效率为1.37％.
為瞭進一步優化黃瓜遺傳轉化體繫,提高遺傳轉化效率,構建含有自身啟動子的黃瓜果瘤基因(T“)錶達載體pCAMBIA2301-Tu,將錶達載體通過電擊法導入農桿菌菌株GV3101中,進行農桿菌介導的黃瓜遺傳轉化的研究.使用限製性內切酶K pnI和BamHI對質粒pCAMBIA2301和Tu基因PCR產物進行雙酶切,迴收目的片段,連接後成功構建Tu基因錶達載體.通過優化遺傳轉化的生根條件以及抑製農桿菌生長條件,一定程度上提高瞭遺傳轉化的效率.580箇外植體通過抗生素篩選穫得的18株再生苗進行PCR檢測和測序鑒定,最終穫得8株暘性轉化苗,轉化效率為1.37％.
위료진일보우화황과유전전화체계,제고유전전화효솔,구건함유자신계동자적황과과류기인(T“)표체재체pCAMBIA2301-Tu,장표체재체통과전격법도입농간균균주GV3101중,진행농간균개도적황과유전전화적연구.사용한제성내절매K pnI화BamHI대질립pCAMBIA2301화Tu기인PCR산물진행쌍매절,회수목적편단,련접후성공구건Tu기인표체재체.통과우화유전전화적생근조건이급억제농간균생장조건,일정정도상제고료유전전화적효솔.580개외식체통과항생소사선획득적18주재생묘진행PCR검측화측서감정,최종획득8주양성전화묘,전화효솔위1.37％.
