中国比较医学杂志
中國比較醫學雜誌
중국비교의학잡지
CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE
2013年
8期
9-13,19
,共6页
CAR菌%16S rRNA基因%小沟结合物探针%实时荧光定量PCR%快速检测
CAR菌%16S rRNA基因%小溝結閤物探針%實時熒光定量PCR%快速檢測
CAR균%16S rRNA기인%소구결합물탐침%실시형광정량PCR%쾌속검측
Cilia-associated respiratory(CAR)bacillus%16S ribosomal RNA gene%Minor groove binder probe%Real-time fluorescence quantitative PCR%Rapid detection
目的 建立特异、敏感、快速检测CAR菌的TaqMan MGB探针荧光定量PCR方法.方法 针对CAR菌16S rRNA基因序列设计特异性引物和探针,建立MGB探针荧光定量PCR方法,验证方法的特异性、敏感性和稳定性.对2008～2012年期间采集的1344份临床标本中的CAR菌进行检测,同时进行普通PCR检测作为对照.结果 CAR菌TaqMan MGB探针荧光定量PCR方法具有高度特异性,与肺炎支原体、侵肺巴斯德菌、支气管鲍特杆菌、肺炎克雷伯杆菌、大肠埃希菌、肺炎链球菌间无交叉反应,检测灵敏度达2.7拷贝.标准曲线显示各浓度范围内具有良好线性关系,相关系数为0.999,斜率为-3.22,TaqMan MGB探针荧光定量PCR效率为104.432％.对1344份标本进行检测,结果 TaqMan MGB探针荧光定量PCR检出510份CAR菌阳性样本.TaqMan MGB探针荧光定量PCR能够直接从标本中检出CAR菌DNA,检测时间仅为40 min.结论 TaqMan MGB探针荧光定量PCR方法具有可靠、特异、敏感的特点,适用于CAR菌的快速检测.
目的 建立特異、敏感、快速檢測CAR菌的TaqMan MGB探針熒光定量PCR方法.方法 針對CAR菌16S rRNA基因序列設計特異性引物和探針,建立MGB探針熒光定量PCR方法,驗證方法的特異性、敏感性和穩定性.對2008～2012年期間採集的1344份臨床標本中的CAR菌進行檢測,同時進行普通PCR檢測作為對照.結果 CAR菌TaqMan MGB探針熒光定量PCR方法具有高度特異性,與肺炎支原體、侵肺巴斯德菌、支氣管鮑特桿菌、肺炎剋雷伯桿菌、大腸埃希菌、肺炎鏈毬菌間無交扠反應,檢測靈敏度達2.7拷貝.標準麯線顯示各濃度範圍內具有良好線性關繫,相關繫數為0.999,斜率為-3.22,TaqMan MGB探針熒光定量PCR效率為104.432％.對1344份標本進行檢測,結果 TaqMan MGB探針熒光定量PCR檢齣510份CAR菌暘性樣本.TaqMan MGB探針熒光定量PCR能夠直接從標本中檢齣CAR菌DNA,檢測時間僅為40 min.結論 TaqMan MGB探針熒光定量PCR方法具有可靠、特異、敏感的特點,適用于CAR菌的快速檢測.
목적 건립특이、민감、쾌속검측CAR균적TaqMan MGB탐침형광정량PCR방법.방법 침대CAR균16S rRNA기인서렬설계특이성인물화탐침,건립MGB탐침형광정량PCR방법,험증방법적특이성、민감성화은정성.대2008～2012년기간채집적1344빈림상표본중적CAR균진행검측,동시진행보통PCR검측작위대조.결과 CAR균TaqMan MGB탐침형광정량PCR방법구유고도특이성,여폐염지원체、침폐파사덕균、지기관포특간균、폐염극뢰백간균、대장애희균、폐염련구균간무교차반응,검측령민도체2.7고패.표준곡선현시각농도범위내구유량호선성관계,상관계수위0.999,사솔위-3.22,TaqMan MGB탐침형광정량PCR효솔위104.432％.대1344빈표본진행검측,결과 TaqMan MGB탐침형광정량PCR검출510빈CAR균양성양본.TaqMan MGB탐침형광정량PCR능구직접종표본중검출CAR균DNA,검측시간부위40 min.결론 TaqMan MGB탐침형광정량PCR방법구유가고、특이、민감적특점,괄용우CAR균적쾌속검측.
