热带作物学报
熱帶作物學報
열대작물학보
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
2013年
8期
1473-1477
,共5页
华玉伟%杨加伟%黄天带%李季%黄华孙
華玉偉%楊加偉%黃天帶%李季%黃華孫
화옥위%양가위%황천대%리계%황화손
橡胶树%启动子%启动子陷阱%遗传转化%GUS基因表达
橡膠樹%啟動子%啟動子陷阱%遺傳轉化%GUS基因錶達
상효수%계동자%계동자함정%유전전화%GUS기인표체
Hevea brasliensis%Promoter%Promoter trapping%Genetic transformation%GUS gene expression
启动子陷阱技术是克隆未知基因启动子的有效途径.首先用反向无启动子的GUSA替换pCAMBIA-2301载体上的GUSA及启动子序列,构建橡胶树启动子陷阱载体pCAMBIA2301:GUS-NOS,然后转化橡胶树.结果表明:获得了GUS染色阳性胚状体6个,再生后获得2个转基因株系.其中1个株系在胚状体、叶片和根中能检测到GUS基因的强烈表达,另1个株系仅在根中检测到微弱的GUS基因表达,说明获得的转基因植株为不同启动子启动GUS基因的株系.因此通过橡胶树启动子陷阱载体的构建及其在橡胶树中的表达,能够发现和克隆橡胶树内源基因的启动子.
啟動子陷阱技術是剋隆未知基因啟動子的有效途徑.首先用反嚮無啟動子的GUSA替換pCAMBIA-2301載體上的GUSA及啟動子序列,構建橡膠樹啟動子陷阱載體pCAMBIA2301:GUS-NOS,然後轉化橡膠樹.結果錶明:穫得瞭GUS染色暘性胚狀體6箇,再生後穫得2箇轉基因株繫.其中1箇株繫在胚狀體、葉片和根中能檢測到GUS基因的彊烈錶達,另1箇株繫僅在根中檢測到微弱的GUS基因錶達,說明穫得的轉基因植株為不同啟動子啟動GUS基因的株繫.因此通過橡膠樹啟動子陷阱載體的構建及其在橡膠樹中的錶達,能夠髮現和剋隆橡膠樹內源基因的啟動子.
계동자함정기술시극륭미지기인계동자적유효도경.수선용반향무계동자적GUSA체환pCAMBIA-2301재체상적GUSA급계동자서렬,구건상효수계동자함정재체pCAMBIA2301:GUS-NOS,연후전화상효수.결과표명:획득료GUS염색양성배상체6개,재생후획득2개전기인주계.기중1개주계재배상체、협편화근중능검측도GUS기인적강렬표체,령1개주계부재근중검측도미약적GUS기인표체,설명획득적전기인식주위불동계동자계동GUS기인적주계.인차통과상효수계동자함정재체적구건급기재상효수중적표체,능구발현화극륭상효수내원기인적계동자.
