医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2014年
1期
17-21
,共5页
李莎%汪雯雯%吴章颖%阿比丹·吐尔汗江%王世宣
李莎%汪雯雯%吳章穎%阿比丹·吐爾汗江%王世宣
리사%왕문문%오장영%아비단·토이한강%왕세선
IGF1R%启动子%荧光素酶报告基因%载体构建
IGF1R%啟動子%熒光素酶報告基因%載體構建
IGF1R%계동자%형광소매보고기인%재체구건
目的 克隆人IGF1R基因启动子序列,构建IGF1R基因启动子荧光素酶报告基因载体.方法 运用PCR方法从HeLa细胞基因组DNA中获得目的 基因;双酶切后连接到荧光素酶报告基因载体上,构建IGF1R基因启动子报告基因载体;将重组质粒转染至HeLa细胞48 h后,采用双荧光素酶报告基因系统检测其启动子活性.结果 PCR扩增出800 bp左右IGF1R基因启动子片段;双酶切及测序鉴定重组体构建正确;转染HeLa细胞后经双荧光素酶报告基因检测确定重组体有启动子活性.结论 成功构建了IGF1R启动子报告基因载体,在细胞系中进行初步的活性分析得知所克隆的IGF1R基因调控序列内包含启动子活性区域.
目的 剋隆人IGF1R基因啟動子序列,構建IGF1R基因啟動子熒光素酶報告基因載體.方法 運用PCR方法從HeLa細胞基因組DNA中穫得目的 基因;雙酶切後連接到熒光素酶報告基因載體上,構建IGF1R基因啟動子報告基因載體;將重組質粒轉染至HeLa細胞48 h後,採用雙熒光素酶報告基因繫統檢測其啟動子活性.結果 PCR擴增齣800 bp左右IGF1R基因啟動子片段;雙酶切及測序鑒定重組體構建正確;轉染HeLa細胞後經雙熒光素酶報告基因檢測確定重組體有啟動子活性.結論 成功構建瞭IGF1R啟動子報告基因載體,在細胞繫中進行初步的活性分析得知所剋隆的IGF1R基因調控序列內包含啟動子活性區域.
목적 극륭인IGF1R기인계동자서렬,구건IGF1R기인계동자형광소매보고기인재체.방법 운용PCR방법종HeLa세포기인조DNA중획득목적 기인;쌍매절후련접도형광소매보고기인재체상,구건IGF1R기인계동자보고기인재체;장중조질립전염지HeLa세포48 h후,채용쌍형광소매보고기인계통검측기계동자활성.결과 PCR확증출800 bp좌우IGF1R기인계동자편단;쌍매절급측서감정중조체구건정학;전염HeLa세포후경쌍형광소매보고기인검측학정중조체유계동자활성.결론 성공구건료IGF1R계동자보고기인재체,재세포계중진행초보적활성분석득지소극륭적IGF1R기인조공서렬내포함계동자활성구역.
