中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2014年
2期
179-185
,共7页
袁凤刚%郝艳玲%张春平%陈永刚%朱孝荣
袁鳳剛%郝豔玲%張春平%陳永剛%硃孝榮
원봉강%학염령%장춘평%진영강%주효영
MK801%全脑缺血/再灌注%细胞凋亡%ASK1%信号通路%S-亚硝基化%nNOS
MK801%全腦缺血/再灌註%細胞凋亡%ASK1%信號通路%S-亞硝基化%nNOS
MK801%전뇌결혈/재관주%세포조망%ASK1%신호통로%S-아초기화%nNOS
目的 探讨MK801(dizocilpine,地佐环平)对全脑缺血/再灌注后神经型一氧化氮合成酶(nNOS)介导的凋亡信号调节激酶1(apoptosis signal-regulating kinase 1,ASK1)信号通路及海马CA1区细胞凋亡的影响.方法采用四动脉结扎法构建大鼠全脑缺血模型.SD大鼠腹腔注射MK801(30 mg·kg-1).通过"生物素转化法"(Biotin-Swich method)检测蛋白质的S-亚硝基化.然后运用免疫印迹、免疫共沉淀和免疫组织化学等方法对蛋白质的磷酸化以及蛋白质之间的相互作用进行研究;应用焦油紫染色的方法检测脑缺血/再灌注后海马CA1区的细胞凋亡情况.结果 脑缺血/再灌注引起了ASK1的S-亚硝基化;MK801明显地抑制了脑缺血/再灌注诱导的ASK1的S-亚硝基化的增加;MK801明显降低了Thr845的磷酸化水平、增加了Ser83位的磷酸化水平,从而降低了ASK1的活性;MK801引起ASK1下游MKK4/7-JNK信号通路及下游凋亡的核通路也产生了相应的变化.结论 MK801能够抑制SD大鼠全脑缺血/再灌注引起ASK1的S-亚硝基化,进而影响ASK1凋亡信号通路,对神经元损伤起到保护作用.
目的 探討MK801(dizocilpine,地佐環平)對全腦缺血/再灌註後神經型一氧化氮閤成酶(nNOS)介導的凋亡信號調節激酶1(apoptosis signal-regulating kinase 1,ASK1)信號通路及海馬CA1區細胞凋亡的影響.方法採用四動脈結扎法構建大鼠全腦缺血模型.SD大鼠腹腔註射MK801(30 mg·kg-1).通過"生物素轉化法"(Biotin-Swich method)檢測蛋白質的S-亞硝基化.然後運用免疫印跡、免疫共沉澱和免疫組織化學等方法對蛋白質的燐痠化以及蛋白質之間的相互作用進行研究;應用焦油紫染色的方法檢測腦缺血/再灌註後海馬CA1區的細胞凋亡情況.結果 腦缺血/再灌註引起瞭ASK1的S-亞硝基化;MK801明顯地抑製瞭腦缺血/再灌註誘導的ASK1的S-亞硝基化的增加;MK801明顯降低瞭Thr845的燐痠化水平、增加瞭Ser83位的燐痠化水平,從而降低瞭ASK1的活性;MK801引起ASK1下遊MKK4/7-JNK信號通路及下遊凋亡的覈通路也產生瞭相應的變化.結論 MK801能夠抑製SD大鼠全腦缺血/再灌註引起ASK1的S-亞硝基化,進而影響ASK1凋亡信號通路,對神經元損傷起到保護作用.
목적 탐토MK801(dizocilpine,지좌배평)대전뇌결혈/재관주후신경형일양화담합성매(nNOS)개도적조망신호조절격매1(apoptosis signal-regulating kinase 1,ASK1)신호통로급해마CA1구세포조망적영향.방법채용사동맥결찰법구건대서전뇌결혈모형.SD대서복강주사MK801(30 mg·kg-1).통과"생물소전화법"(Biotin-Swich method)검측단백질적S-아초기화.연후운용면역인적、면역공침정화면역조직화학등방법대단백질적린산화이급단백질지간적상호작용진행연구;응용초유자염색적방법검측뇌결혈/재관주후해마CA1구적세포조망정황.결과 뇌결혈/재관주인기료ASK1적S-아초기화;MK801명현지억제료뇌결혈/재관주유도적ASK1적S-아초기화적증가;MK801명현강저료Thr845적린산화수평、증가료Ser83위적린산화수평,종이강저료ASK1적활성;MK801인기ASK1하유MKK4/7-JNK신호통로급하유조망적핵통로야산생료상응적변화.결론 MK801능구억제SD대서전뇌결혈/재관주인기ASK1적S-아초기화,진이영향ASK1조망신호통로,대신경원손상기도보호작용.
