中国比较医学杂志
中國比較醫學雜誌
중국비교의학잡지
CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE
2014年
2期
1-6
,共6页
N-LMP1%CR2%猪胚胎成纤维细胞%鼻咽癌
N-LMP1%CR2%豬胚胎成纖維細胞%鼻嚥癌
N-LMP1%CR2%저배태성섬유세포%비인암
目的 构建上皮组织特异性表达鼻咽癌来源潜伏膜蛋白1(N-LMP1)和人补体受体2(CR2)真核表达载体,转染猪胚胎成纤维细胞并筛选整合有N-LMP1和CR2基因的细胞克隆,为构建与EBV感染相关的猪鼻咽癌模型奠定基础.方法 通过直接合成ED-L2启动子和N-LMP1,从人B淋巴细胞中的RNA经RT-PCR扩增出CR2,将上述3个片段逐个连接到真核表达载体pN1上,构建上皮组织特异性表达N-LMP1和CR2的载体pN1-ED-L2-N-LMP1-CR2;用脂质体转染猪胚胎成纤维细胞,经药物G418 筛选和PCR鉴定阳性克隆.结果 成功构建上皮组织特异性表达N-LMP1和CR2的真核表达载体pN1-ED-L2-N-LMP1-CR2,并成功整合到猪胚胎成纤维细胞的基因组中,获得了整合有目的 基因N-LMP1和CR2的猪胚胎成纤维细胞克隆.结论 获得了上皮组织特异性表达N-LMP1和CR2 的猪胚胎成纤维细胞克隆,为通过细胞核移植方法获得表达N-LMP1和CR2转基因猪提供了供体细胞.
目的 構建上皮組織特異性錶達鼻嚥癌來源潛伏膜蛋白1(N-LMP1)和人補體受體2(CR2)真覈錶達載體,轉染豬胚胎成纖維細胞併篩選整閤有N-LMP1和CR2基因的細胞剋隆,為構建與EBV感染相關的豬鼻嚥癌模型奠定基礎.方法 通過直接閤成ED-L2啟動子和N-LMP1,從人B淋巴細胞中的RNA經RT-PCR擴增齣CR2,將上述3箇片段逐箇連接到真覈錶達載體pN1上,構建上皮組織特異性錶達N-LMP1和CR2的載體pN1-ED-L2-N-LMP1-CR2;用脂質體轉染豬胚胎成纖維細胞,經藥物G418 篩選和PCR鑒定暘性剋隆.結果 成功構建上皮組織特異性錶達N-LMP1和CR2的真覈錶達載體pN1-ED-L2-N-LMP1-CR2,併成功整閤到豬胚胎成纖維細胞的基因組中,穫得瞭整閤有目的 基因N-LMP1和CR2的豬胚胎成纖維細胞剋隆.結論 穫得瞭上皮組織特異性錶達N-LMP1和CR2 的豬胚胎成纖維細胞剋隆,為通過細胞覈移植方法穫得錶達N-LMP1和CR2轉基因豬提供瞭供體細胞.
목적 구건상피조직특이성표체비인암래원잠복막단백1(N-LMP1)화인보체수체2(CR2)진핵표체재체,전염저배태성섬유세포병사선정합유N-LMP1화CR2기인적세포극륭,위구건여EBV감염상관적저비인암모형전정기출.방법 통과직접합성ED-L2계동자화N-LMP1,종인B림파세포중적RNA경RT-PCR확증출CR2,장상술3개편단축개련접도진핵표체재체pN1상,구건상피조직특이성표체N-LMP1화CR2적재체pN1-ED-L2-N-LMP1-CR2;용지질체전염저배태성섬유세포,경약물G418 사선화PCR감정양성극륭.결과 성공구건상피조직특이성표체N-LMP1화CR2적진핵표체재체pN1-ED-L2-N-LMP1-CR2,병성공정합도저배태성섬유세포적기인조중,획득료정합유목적 기인N-LMP1화CR2적저배태성섬유세포극륭.결론 획득료상피조직특이성표체N-LMP1화CR2 적저배태성섬유세포극륭,위통과세포핵이식방법획득표체N-LMP1화CR2전기인저제공료공체세포.
