CAJ | 학술논문

目的探讨熊果酸(UA)对氧诱导新生小鼠视网膜病变模型新生血管形态学的影响.方法将7日龄清洁级C57BL/6J小鼠60只采用随机数字表法随机分为6组:空白对照组、模型对照组(PBS)、阳性对照组(曲安奈德)和UA干预组(低、中、高剂量),每组10只小鼠(均取右眼,各10只眼).空白对照组小鼠在空气中喂养,其他各组均置于体积分数(750±20) mL/L氧气(O2)的高体积分数氧环境中饲养,连续5d.至小鼠出生12 d时将模型对照组小鼠及其哺乳母鼠返回正常空气环境(210 mL/L O2)中,以诱导小鼠视网膜新生血管产生.模型成功后,立即给予各组相应的药物治疗:模型对照组小鼠玻璃体腔注射无菌PBS 3 μL,UA干预组(低、中、高剂量)小鼠分别玻璃体腔注射1.5、3.0、6.0 μg UA各3μL,阳性对照组小鼠玻璃体腔曲安奈德注射液(1 mL∶40 mg)3μL.17日龄时过量麻醉处死小鼠,摘除眼球制备标本.制作视网膜组织病理切片,HE染色,计数突破视网膜内界膜的新生血管内皮细胞核数目;并采用视网膜铺片技术观察各组小鼠视网膜新生血管形态改变.结果组织病理切片观察结果:空白对照组视网膜内界膜结构均一,血管内皮细胞排列整齐,偶见血管内皮细胞突破内界膜.模型对照组可见大量血管内皮细胞团突破内界膜,形成新生血管腔.不同剂量UA干预组比较,高剂量UA干预组与阳性对照组接近,可见少量血管内皮细胞突破内界膜,内界膜结构较均一,未形成或者形成新生血管腔.突破小鼠视网膜内界膜的新生血管内皮细胞核数比较:模型对照组明显高于空白对照组(P＜0.05);高剂量UA干预组明显低于模型对照组(P＜0.05);高剂量UA干预组明显低于低剂量UA干预组(P＜0.05).视网膜铺片显示:空白对照组视网膜血管自视盘向四周呈放射状均匀分布,管径较粗,分支良好,周边视网膜血管结构清晰.模型对照组视网膜大量新生血管,管径纤细,走行僵直,结构紊乱,分布不均匀,中央可见大片无灌注区.不同剂量UA干预组比较:高剂量UA干预组视网膜血管分布和走形与阳性对照组接近,较模型对照组新生血管分布明显好转,且明显较低剂量干预组的视网膜新生血管分布好,无明显的无灌注区.结论 UA抑制氧诱导小鼠视网膜新生血管的形成,且抑制效果呈剂量依赖性. 目的探討熊果痠(UA)對氧誘導新生小鼠視網膜病變模型新生血管形態學的影響.方法將7日齡清潔級C57BL/6J小鼠60隻採用隨機數字錶法隨機分為6組:空白對照組、模型對照組(PBS)、暘性對照組(麯安奈德)和UA榦預組(低、中、高劑量),每組10隻小鼠(均取右眼,各10隻眼).空白對照組小鼠在空氣中餵養,其他各組均置于體積分數(750±20) mL/L氧氣(O2)的高體積分數氧環境中飼養,連續5d.至小鼠齣生12 d時將模型對照組小鼠及其哺乳母鼠返迴正常空氣環境(210 mL/L O2)中,以誘導小鼠視網膜新生血管產生.模型成功後,立即給予各組相應的藥物治療:模型對照組小鼠玻璃體腔註射無菌PBS 3 μL,UA榦預組(低、中、高劑量)小鼠分彆玻璃體腔註射1.5、3.0、6.0 μg UA各3μL,暘性對照組小鼠玻璃體腔麯安奈德註射液(1 mL∶40 mg)3μL.17日齡時過量痳醉處死小鼠,摘除眼毬製備標本.製作視網膜組織病理切片,HE染色,計數突破視網膜內界膜的新生血管內皮細胞覈數目;併採用視網膜鋪片技術觀察各組小鼠視網膜新生血管形態改變.結果組織病理切片觀察結果:空白對照組視網膜內界膜結構均一,血管內皮細胞排列整齊,偶見血管內皮細胞突破內界膜.模型對照組可見大量血管內皮細胞糰突破內界膜,形成新生血管腔.不同劑量UA榦預組比較,高劑量UA榦預組與暘性對照組接近,可見少量血管內皮細胞突破內界膜,內界膜結構較均一,未形成或者形成新生血管腔.突破小鼠視網膜內界膜的新生血管內皮細胞覈數比較:模型對照組明顯高于空白對照組(P＜0.05);高劑量UA榦預組明顯低于模型對照組(P＜0.05);高劑量UA榦預組明顯低于低劑量UA榦預組(P＜0.05).視網膜鋪片顯示:空白對照組視網膜血管自視盤嚮四週呈放射狀均勻分佈,管徑較粗,分支良好,週邊視網膜血管結構清晰.模型對照組視網膜大量新生血管,管徑纖細,走行僵直,結構紊亂,分佈不均勻,中央可見大片無灌註區.不同劑量UA榦預組比較:高劑量UA榦預組視網膜血管分佈和走形與暘性對照組接近,較模型對照組新生血管分佈明顯好轉,且明顯較低劑量榦預組的視網膜新生血管分佈好,無明顯的無灌註區.結論 UA抑製氧誘導小鼠視網膜新生血管的形成,且抑製效果呈劑量依賴性.
목적 탐토웅과산(UA)대양유도신생소서시망막병변모형신생혈관형태학적영향.방법 장7일령청길급C57BL/6J소서60지채용수궤수자표법수궤분위6조:공백대조조、모형대조조(PBS)、양성대조조(곡안내덕)화UA간예조(저、중、고제량),매조10지소서(균취우안,각10지안).공백대조조소서재공기중위양,기타각조균치우체적분수(750±20) mL/L양기(O2)적고체적분수양배경중사양,련속5d.지소서출생12 d시장모형대조조소서급기포유모서반회정상공기배경(210 mL/L O2)중,이유도소서시망막신생혈관산생.모형성공후,립즉급여각조상응적약물치료:모형대조조소서파리체강주사무균PBS 3 μL,UA간예조(저、중、고제량)소서분별파리체강주사1.5、3.0、6.0 μg UA각3μL,양성대조조소서파리체강곡안내덕주사액(1 mL∶40 mg)3μL.17일령시과량마취처사소서,적제안구제비표본.제작시망막조직병리절편,HE염색,계수돌파시망막내계막적신생혈관내피세포핵수목;병채용시망막포편기술관찰각조소서시망막신생혈관형태개변.결과 조직병리절편관찰결과:공백대조조시망막내계막결구균일,혈관내피세포배렬정제,우견혈관내피세포돌파내계막.모형대조조가견대량혈관내피세포단돌파내계막,형성신생혈관강.불동제량UA간예조비교,고제량UA간예조여양성대조조접근,가견소량혈관내피세포돌파내계막,내계막결구교균일,미형성혹자형성신생혈관강.돌파소서시망막내계막적신생혈관내피세포핵수비교:모형대조조명현고우공백대조조(P＜0.05);고제량UA간예조명현저우모형대조조(P＜0.05);고제량UA간예조명현저우저제량UA간예조(P＜0.05).시망막포편현시:공백대조조시망막혈관자시반향사주정방사상균균분포,관경교조,분지량호,주변시망막혈관결구청석.모형대조조시망막대량신생혈관,관경섬세,주행강직,결구문란,분포불균균,중앙가견대편무관주구.불동제량UA간예조비교:고제량UA간예조시망막혈관분포화주형여양성대조조접근,교모형대조조신생혈관분포명현호전,차명현교저제량간예조적시망막신생혈관분포호,무명현적무관주구.결론 UA억제양유도소서시망막신생혈관적형성,차억제효과정제량의뢰성.