氨基酸和生物资源
氨基痠和生物資源
안기산화생물자원
AMINO ACIDS AND BIOTIC RESOURCES
2013年
4期
43-46
,共4页
不依赖连接克隆%Gateway重组克隆%UDG克隆
不依賴連接剋隆%Gateway重組剋隆%UDG剋隆
불의뢰련접극륭%Gateway중조극륭%UDG극륭
ligation independent cloning%gateway recombinational cloning%uracil DNA glycosylase cloning
基因表达及功能分析需要高通量的表达系统,因而简单、经济且高效地将PCR产物或其他来源的目的基因片段构建到质粒载体中就成为了亟需解决的问题.传统克隆方法使用限制性内切酶和连接酶,其缺点是受到基因序列中原有的酶切位点的限制以及依赖连接酶导致的较低的连接转化率.为了克服这些缺点,一些不需要限制酶和连接酶的克隆方法被开发出来并运用到基因克隆中,获得了更佳的实验结果.该文就LIC、UDG克隆和Gateway重组克隆这三种不依赖连接反应的高通量克隆方法的原理及特性进行介绍.
基因錶達及功能分析需要高通量的錶達繫統,因而簡單、經濟且高效地將PCR產物或其他來源的目的基因片段構建到質粒載體中就成為瞭亟需解決的問題.傳統剋隆方法使用限製性內切酶和連接酶,其缺點是受到基因序列中原有的酶切位點的限製以及依賴連接酶導緻的較低的連接轉化率.為瞭剋服這些缺點,一些不需要限製酶和連接酶的剋隆方法被開髮齣來併運用到基因剋隆中,穫得瞭更佳的實驗結果.該文就LIC、UDG剋隆和Gateway重組剋隆這三種不依賴連接反應的高通量剋隆方法的原理及特性進行介紹.
기인표체급공능분석수요고통량적표체계통,인이간단、경제차고효지장PCR산물혹기타래원적목적기인편단구건도질립재체중취성위료극수해결적문제.전통극륭방법사용한제성내절매화련접매,기결점시수도기인서렬중원유적매절위점적한제이급의뢰련접매도치적교저적련접전화솔.위료극복저사결점,일사불수요한제매화련접매적극륭방법피개발출래병운용도기인극륭중,획득료경가적실험결과.해문취LIC、UDG극륭화Gateway중조극륭저삼충불의뢰련접반응적고통량극륭방법적원리급특성진행개소.
