实验动物科学
實驗動物科學
실험동물과학
LABORATORY ANIMAL SCIENCE
2013年
6期
26-30,40
,共6页
郭守利%张一飞%郝天军%孙艳
郭守利%張一飛%郝天軍%孫豔
곽수리%장일비%학천군%손염
15-KETE%细胞外信号调节激酶%肺动脉血管平滑肌细胞
15-KETE%細胞外信號調節激酶%肺動脈血管平滑肌細胞
15-KETE%세포외신호조절격매%폐동맥혈관평활기세포
15-KETE%extracellular signal-regulated kinase (ERK)%pulmonary artery smooth muscle cells
目的 从细胞分子水平上研究15-酮基二十碳四烯酸(15-ketoeicosatetretraenoic acid,15-KETE)对大鼠肺动脉平滑肌细胞上ERK1/2的活性的影响.方法 通过酶法分离、培养SD大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterialsmooth cells,PASMCs),使用Western blot技术观察15-KETE对大鼠PASMCs上ERK1/2活性的影响.结果 1)10-6mol/L 15-KETE作用从0.5h到24 h与对照组(未加15-KETE)比较,对ERK1/2总量没有明显的影响.2)与对照组比较,15-KETE处理0.5、1.0、2.0、4.0、8.0h明显增强p-ERK1/2(P ＜0.05).3)与对照组比较,10-8、10-7和10-6mol/L 15-KETE明显增强p-ERK1/2(P＜0.05),随15-KETE浓度增大,p-ERK1/2增多.4)与15-KETE作用比较,ERK1/2抑制剂PD98059 20 μmol/L、50 μmol/L和U0126 0.1μmol/L、1μmol/L均能抑制15-KETE对ERK1/2的活化(P＜0.05),并且随着抑制剂浓度增大,抑制作用加强.结论 15-KETE对大鼠肺动脉血管平滑肌细胞上的ERK1/2表达没有明显的影响,但能激活肺动脉血管平滑肌细胞ERK1/2,使其磷酸化,并呈时间-剂量依赖关系.ERK1/2通路的特异性抑制剂PD98059、U0126能抑制15-KETE对ERK1/2的磷酸化.
目的 從細胞分子水平上研究15-酮基二十碳四烯痠(15-ketoeicosatetretraenoic acid,15-KETE)對大鼠肺動脈平滑肌細胞上ERK1/2的活性的影響.方法 通過酶法分離、培養SD大鼠肺動脈平滑肌細胞(pulmonary arterialsmooth cells,PASMCs),使用Western blot技術觀察15-KETE對大鼠PASMCs上ERK1/2活性的影響.結果 1)10-6mol/L 15-KETE作用從0.5h到24 h與對照組(未加15-KETE)比較,對ERK1/2總量沒有明顯的影響.2)與對照組比較,15-KETE處理0.5、1.0、2.0、4.0、8.0h明顯增彊p-ERK1/2(P ＜0.05).3)與對照組比較,10-8、10-7和10-6mol/L 15-KETE明顯增彊p-ERK1/2(P＜0.05),隨15-KETE濃度增大,p-ERK1/2增多.4)與15-KETE作用比較,ERK1/2抑製劑PD98059 20 μmol/L、50 μmol/L和U0126 0.1μmol/L、1μmol/L均能抑製15-KETE對ERK1/2的活化(P＜0.05),併且隨著抑製劑濃度增大,抑製作用加彊.結論 15-KETE對大鼠肺動脈血管平滑肌細胞上的ERK1/2錶達沒有明顯的影響,但能激活肺動脈血管平滑肌細胞ERK1/2,使其燐痠化,併呈時間-劑量依賴關繫.ERK1/2通路的特異性抑製劑PD98059、U0126能抑製15-KETE對ERK1/2的燐痠化.
목적 종세포분자수평상연구15-동기이십탄사희산(15-ketoeicosatetretraenoic acid,15-KETE)대대서폐동맥평활기세포상ERK1/2적활성적영향.방법 통과매법분리、배양SD대서폐동맥평활기세포(pulmonary arterialsmooth cells,PASMCs),사용Western blot기술관찰15-KETE대대서PASMCs상ERK1/2활성적영향.결과 1)10-6mol/L 15-KETE작용종0.5h도24 h여대조조(미가15-KETE)비교,대ERK1/2총량몰유명현적영향.2)여대조조비교,15-KETE처리0.5、1.0、2.0、4.0、8.0h명현증강p-ERK1/2(P ＜0.05).3)여대조조비교,10-8、10-7화10-6mol/L 15-KETE명현증강p-ERK1/2(P＜0.05),수15-KETE농도증대,p-ERK1/2증다.4)여15-KETE작용비교,ERK1/2억제제PD98059 20 μmol/L、50 μmol/L화U0126 0.1μmol/L、1μmol/L균능억제15-KETE대ERK1/2적활화(P＜0.05),병차수착억제제농도증대,억제작용가강.결론 15-KETE대대서폐동맥혈관평활기세포상적ERK1/2표체몰유명현적영향,단능격활폐동맥혈관평활기세포ERK1/2,사기린산화,병정시간-제량의뢰관계.ERK1/2통로적특이성억제제PD98059、U0126능억제15-KETE대ERK1/2적린산화.
