汕头大学学报（自然科学版）
汕頭大學學報（自然科學版）
산두대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SHANTOU UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE EDITION)
2013年
3期
52-63
,共12页
伦镜盛%袁传飞%夏常艳%王娅琴%郭川%黄通旺%胡忠
倫鏡盛%袁傳飛%夏常豔%王婭琴%郭川%黃通旺%鬍忠
륜경성%원전비%하상염%왕아금%곽천%황통왕%호충
弧菌%外膜蛋白%OmpK%免疫交叉反应性
弧菌%外膜蛋白%OmpK%免疫交扠反應性
호균%외막단백%OmpK%면역교차반응성
本研究旨在研究弧菌外膜蛋白(outer membrane protein,OMP)OmpK免疫交叉反应的特征,探讨OmpK免疫交叉反应性的分子机制.利用克隆得到5株弧菌的ompK基因,通过比对10种(22株)弧菌的OmpK基因序列发现,ompK基因在弧菌中高度保守,其核苷酸序列的相似性达77％～93％.对副溶血弧菌(V.parahaemolyticus)VPL4-90的ompK基因进行原核表达,利用纯化的OmpK重组蛋白,制备了兔抗OmpK血清.通过western blot分析发现,OmpK抗血清能够与16种不同的弧菌发生交叉识别反应,其中V.proteolyticus、V.furnissii、V.damsela和V.metschnikovii这4种弧菌OmpK的免疫交叉反应为首次报道,并且证实弧菌OmpK的免疫交叉反应具有种属特异性.通过抗原表位预测和比对发现,弧菌的OmpK具有8个保守的抗原表位,包括7个T细胞表位以及1个T细胞和B细胞的共同表位.流式细胞术分析显示,OmpK抗体能够识别这些相同或相似的抗原表位,提示这些抗原表位可能位于细菌表面.结果表明,这些保守的且位于细胞表面的OmpK抗原表位可能是弧菌OmpK具有免疫交叉反应性的分子基础.
本研究旨在研究弧菌外膜蛋白(outer membrane protein,OMP)OmpK免疫交扠反應的特徵,探討OmpK免疫交扠反應性的分子機製.利用剋隆得到5株弧菌的ompK基因,通過比對10種(22株)弧菌的OmpK基因序列髮現,ompK基因在弧菌中高度保守,其覈苷痠序列的相似性達77％～93％.對副溶血弧菌(V.parahaemolyticus)VPL4-90的ompK基因進行原覈錶達,利用純化的OmpK重組蛋白,製備瞭兔抗OmpK血清.通過western blot分析髮現,OmpK抗血清能夠與16種不同的弧菌髮生交扠識彆反應,其中V.proteolyticus、V.furnissii、V.damsela和V.metschnikovii這4種弧菌OmpK的免疫交扠反應為首次報道,併且證實弧菌OmpK的免疫交扠反應具有種屬特異性.通過抗原錶位預測和比對髮現,弧菌的OmpK具有8箇保守的抗原錶位,包括7箇T細胞錶位以及1箇T細胞和B細胞的共同錶位.流式細胞術分析顯示,OmpK抗體能夠識彆這些相同或相似的抗原錶位,提示這些抗原錶位可能位于細菌錶麵.結果錶明,這些保守的且位于細胞錶麵的OmpK抗原錶位可能是弧菌OmpK具有免疫交扠反應性的分子基礎.
본연구지재연구호균외막단백(outer membrane protein,OMP)OmpK면역교차반응적특정,탐토OmpK면역교차반응성적분자궤제.이용극륭득도5주호균적ompK기인,통과비대10충(22주)호균적OmpK기인서렬발현,ompK기인재호균중고도보수,기핵감산서렬적상사성체77％～93％.대부용혈호균(V.parahaemolyticus)VPL4-90적ompK기인진행원핵표체,이용순화적OmpK중조단백,제비료토항OmpK혈청.통과western blot분석발현,OmpK항혈청능구여16충불동적호균발생교차식별반응,기중V.proteolyticus、V.furnissii、V.damsela화V.metschnikovii저4충호균OmpK적면역교차반응위수차보도,병차증실호균OmpK적면역교차반응구유충속특이성.통과항원표위예측화비대발현,호균적OmpK구유8개보수적항원표위,포괄7개T세포표위이급1개T세포화B세포적공동표위.류식세포술분석현시,OmpK항체능구식별저사상동혹상사적항원표위,제시저사항원표위가능위우세균표면.결과표명,저사보수적차위우세포표면적OmpK항원표위가능시호균OmpK구유면역교차반응성적분자기출.
