中国奶牛
中國奶牛
중국내우
CHINA DAIRY CATTLE
2013年
17期
16-21
,共6页
于雪%郭彬%种振路%董平%程英%梁爱心%韩丽%杨利国
于雪%郭彬%種振路%董平%程英%樑愛心%韓麗%楊利國
우설%곽빈%충진로%동평%정영%량애심%한려%양리국
精原干细胞%体外培养%血清%饲养层%鉴定
精原榦細胞%體外培養%血清%飼養層%鑒定
정원간세포%체외배양%혈청%사양층%감정
Spermatogonial stem cells%In vitro culture%Serum%Feeder layer%Identification
本研究首先将水牛睾丸经二步酶消化法制成单细胞悬液,依次采用差速贴壁法和Percoll不连续密度梯度离心法分离和纯化精原细胞.在制备好的小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上,采用含2.5％血清的培养液对精原细胞进行体外培养,观察血清和成纤维细胞对精原细胞生长的影响,并在体外成功培养了2周.通过提取体外培养精原干细胞总RNA,设计引物并对其进行基因鉴定和免疫细胞化学鉴定,证实体外培养所得的细胞仍保持有精原干细胞的特性,并且该克隆是处在未分化状态的精原干细胞形成的.上述研究可为体外建立水牛精原干细胞长期培养体系提供技术支撑.
本研究首先將水牛睪汍經二步酶消化法製成單細胞懸液,依次採用差速貼壁法和Percoll不連續密度梯度離心法分離和純化精原細胞.在製備好的小鼠胎兒成纖維細胞飼養層上,採用含2.5％血清的培養液對精原細胞進行體外培養,觀察血清和成纖維細胞對精原細胞生長的影響,併在體外成功培養瞭2週.通過提取體外培養精原榦細胞總RNA,設計引物併對其進行基因鑒定和免疫細胞化學鑒定,證實體外培養所得的細胞仍保持有精原榦細胞的特性,併且該剋隆是處在未分化狀態的精原榦細胞形成的.上述研究可為體外建立水牛精原榦細胞長期培養體繫提供技術支撐.
본연구수선장수우고환경이보매소화법제성단세포현액,의차채용차속첩벽법화Percoll불련속밀도제도리심법분리화순화정원세포.재제비호적소서태인성섬유세포사양층상,채용함2.5％혈청적배양액대정원세포진행체외배양,관찰혈청화성섬유세포대정원세포생장적영향,병재체외성공배양료2주.통과제취체외배양정원간세포총RNA,설계인물병대기진행기인감정화면역세포화학감정,증실체외배양소득적세포잉보지유정원간세포적특성,병차해극륭시처재미분화상태적정원간세포형성적.상술연구가위체외건립수우정원간세포장기배양체계제공기술지탱.
