中国老年学杂志
中國老年學雜誌
중국노년학잡지
CHINESE JOURNAL OF GERONTOLOGY
2013年
20期
5040-5042
,共3页
廖壮文%黄彦%梁月屏%吕浩然%张珠江
廖壯文%黃彥%樑月屏%呂浩然%張珠江
료장문%황언%량월병%려호연%장주강
重组腺病毒%TFAM%骨关节炎软骨细胞
重組腺病毒%TFAM%骨關節炎軟骨細胞
중조선병독%TFAM%골관절염연골세포
目的 通过构建重组腺病毒载体,转染骨关节炎软骨细胞,探讨线粒体转录因子A(TFAM)保护软骨细胞退变的作用.方法 构建TFAM重组腺病毒载体,并转染骨关节炎软骨细胞.分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western印迹法检测转染后细胞中TFAM mRNA及蛋白的表达情况；鉴定转染后软骨细胞线粒体DNA拷贝数的变化.结果 成功构建TFAM重组腺病毒,且体外转染率高；RT-PCR结果示细胞转染后MOI为500、1 000组TFAM mRNA的表达明显升高(P＜0.01)；Western印迹结果示转染后MOI为500、1 000两组TFAM蛋白表达均升高,其中MOI=1 000组表现最为明显(P＜0.01)；骨关节炎细胞组线粒体DNA的平均拷贝数为(389±117),而MOI=500组为(575±144),MOI=1 000组为(762±179),前者显著低于后两者(P＜0.01).结论 转染TFAM重组腺病毒可正向增强其在软骨细胞中的表达,保持线粒体DNA结构的稳定性.
目的 通過構建重組腺病毒載體,轉染骨關節炎軟骨細胞,探討線粒體轉錄因子A(TFAM)保護軟骨細胞退變的作用.方法 構建TFAM重組腺病毒載體,併轉染骨關節炎軟骨細胞.分彆採用逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)及Western印跡法檢測轉染後細胞中TFAM mRNA及蛋白的錶達情況；鑒定轉染後軟骨細胞線粒體DNA拷貝數的變化.結果 成功構建TFAM重組腺病毒,且體外轉染率高；RT-PCR結果示細胞轉染後MOI為500、1 000組TFAM mRNA的錶達明顯升高(P＜0.01)；Western印跡結果示轉染後MOI為500、1 000兩組TFAM蛋白錶達均升高,其中MOI=1 000組錶現最為明顯(P＜0.01)；骨關節炎細胞組線粒體DNA的平均拷貝數為(389±117),而MOI=500組為(575±144),MOI=1 000組為(762±179),前者顯著低于後兩者(P＜0.01).結論 轉染TFAM重組腺病毒可正嚮增彊其在軟骨細胞中的錶達,保持線粒體DNA結構的穩定性.
목적 통과구건중조선병독재체,전염골관절염연골세포,탐토선립체전록인자A(TFAM)보호연골세포퇴변적작용.방법 구건TFAM중조선병독재체,병전염골관절염연골세포.분별채용역전록-취합매련반응(RT-PCR)급Western인적법검측전염후세포중TFAM mRNA급단백적표체정황；감정전염후연골세포선립체DNA고패수적변화.결과 성공구건TFAM중조선병독,차체외전염솔고；RT-PCR결과시세포전염후MOI위500、1 000조TFAM mRNA적표체명현승고(P＜0.01)；Western인적결과시전염후MOI위500、1 000량조TFAM단백표체균승고,기중MOI=1 000조표현최위명현(P＜0.01)；골관절염세포조선립체DNA적평균고패수위(389±117),이MOI=500조위(575±144),MOI=1 000조위(762±179),전자현저저우후량자(P＜0.01).결론 전염TFAM중조선병독가정향증강기재연골세포중적표체,보지선립체DNA결구적은정성.
