发酵科技通讯
髮酵科技通訊
발효과기통신
FAXIAO KEJI TONGXUN
2013年
3期
1-4
,共4页
重组大肠杆菌%核苷磷酸转移酶%发酵%条件优化
重組大腸桿菌%覈苷燐痠轉移酶%髮酵%條件優化
중조대장간균%핵감린산전이매%발효%조건우화
5’-肌苷酸是一种重要的食品增鲜剂.核苷磷酸转移酶能够高选择性地使肌苷5 '-位羟基磷酸酯化生成5’-肌苷酸,该反应不需要ATP,具有反应条件温和、反应速度快、位置特异性强、转化率高、环境友好等特点.以实验室前期构建的携带有来自Escherichia blattae磷酸转移酶(AP/PTase)编码基因的重组大肠杆菌E.coli BL21 (DE3)/pET28b-AP/PT为菌株,研究了培养基成分对细胞生长和产酶的影响,确定了最优培养基为:甘油7.5 g/L,蛋白胨12.5 g/L,酵母粉10g/L,NaCl 10 g/L,ZnCl2 0.1 g/L,初始pH值7.0.在该条件下,核苷磷酸转移酶酶活达到143.8U/L,比优化前提高了1.0倍.利用该条件下培养获得的菌体为生物催化剂,反应1h,5’-肌苷酸的摩尔收率达到83.3％,表明该核苷磷酸转移酶对肌苷具有良好的活性.
5’-肌苷痠是一種重要的食品增鮮劑.覈苷燐痠轉移酶能夠高選擇性地使肌苷5 '-位羥基燐痠酯化生成5’-肌苷痠,該反應不需要ATP,具有反應條件溫和、反應速度快、位置特異性彊、轉化率高、環境友好等特點.以實驗室前期構建的攜帶有來自Escherichia blattae燐痠轉移酶(AP/PTase)編碼基因的重組大腸桿菌E.coli BL21 (DE3)/pET28b-AP/PT為菌株,研究瞭培養基成分對細胞生長和產酶的影響,確定瞭最優培養基為:甘油7.5 g/L,蛋白胨12.5 g/L,酵母粉10g/L,NaCl 10 g/L,ZnCl2 0.1 g/L,初始pH值7.0.在該條件下,覈苷燐痠轉移酶酶活達到143.8U/L,比優化前提高瞭1.0倍.利用該條件下培養穫得的菌體為生物催化劑,反應1h,5’-肌苷痠的摩爾收率達到83.3％,錶明該覈苷燐痠轉移酶對肌苷具有良好的活性.
5’-기감산시일충중요적식품증선제.핵감린산전이매능구고선택성지사기감5 '-위간기린산지화생성5’-기감산,해반응불수요ATP,구유반응조건온화、반응속도쾌、위치특이성강、전화솔고、배경우호등특점.이실험실전기구건적휴대유래자Escherichia blattae린산전이매(AP/PTase)편마기인적중조대장간균E.coli BL21 (DE3)/pET28b-AP/PT위균주,연구료배양기성분대세포생장화산매적영향,학정료최우배양기위:감유7.5 g/L,단백동12.5 g/L,효모분10g/L,NaCl 10 g/L,ZnCl2 0.1 g/L,초시pH치7.0.재해조건하,핵감린산전이매매활체도143.8U/L,비우화전제고료1.0배.이용해조건하배양획득적균체위생물최화제,반응1h,5’-기감산적마이수솔체도83.3％,표명해핵감린산전이매대기감구유량호적활성.
