山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2013年
40期
6-8
,共3页
方明%康乐%陈英杰%刘健%陶雅军
方明%康樂%陳英傑%劉健%陶雅軍
방명%강악%진영걸%류건%도아군
乳腺癌%缺氧诱导因子1α%短发夹RNA%顺滑蛋白
乳腺癌%缺氧誘導因子1α%短髮夾RNA%順滑蛋白
유선암%결양유도인자1α%단발협RNA%순활단백
breast carcinoma%hypoxia-inducible factor-1 α%shRNA%smoothened prolein
目的 观察缺氧诱导因子1α(HIF-1α)基因对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响,并探讨其可能的机制.方法 构建并筛选HIF-1 α基因的RNAi表达质粒,以脂质体LipofectamineTM 2000介导转染MCF-7细胞.转染后48h,采用实时定量RT-PCR技术检测转染细胞中HIF-1α mRNA的转录水平,筛选有效的HIF-1 αRNAi质粒；CCK-8法比较转染前后乳腺癌细胞增殖变化,实时定量RT-PCR检测顺滑蛋白(SMO)mRNA表达.结果 成功构建含HIF-1α短发夹状RNA(shRNA)1～4的RNAi表达质粒,其中HIF-1 αshRNA-4干扰抑制效率为74％,干扰效果最强(P均＜0.05).HIF-1 αshRNA-4干扰48、72、96 h后,MCF-7细胞的生长抑制率明显升高(P均＜0.05).HIF-1αshRNA-4转染后MCF-7细胞SMO mRNA的相对表达量为0.56 ±0.06,低于转染前的1.07 ±0.16(P ＜0.05).结论 HIF-1α表达可促进乳腺癌细胞增殖,可能与其参与调控SMO的表达有关.
目的 觀察缺氧誘導因子1α(HIF-1α)基因對乳腺癌MCF-7細胞增殖的影響,併探討其可能的機製.方法 構建併篩選HIF-1 α基因的RNAi錶達質粒,以脂質體LipofectamineTM 2000介導轉染MCF-7細胞.轉染後48h,採用實時定量RT-PCR技術檢測轉染細胞中HIF-1α mRNA的轉錄水平,篩選有效的HIF-1 αRNAi質粒；CCK-8法比較轉染前後乳腺癌細胞增殖變化,實時定量RT-PCR檢測順滑蛋白(SMO)mRNA錶達.結果 成功構建含HIF-1α短髮夾狀RNA(shRNA)1～4的RNAi錶達質粒,其中HIF-1 αshRNA-4榦擾抑製效率為74％,榦擾效果最彊(P均＜0.05).HIF-1 αshRNA-4榦擾48、72、96 h後,MCF-7細胞的生長抑製率明顯升高(P均＜0.05).HIF-1αshRNA-4轉染後MCF-7細胞SMO mRNA的相對錶達量為0.56 ±0.06,低于轉染前的1.07 ±0.16(P ＜0.05).結論 HIF-1α錶達可促進乳腺癌細胞增殖,可能與其參與調控SMO的錶達有關.
목적 관찰결양유도인자1α(HIF-1α)기인대유선암MCF-7세포증식적영향,병탐토기가능적궤제.방법 구건병사선HIF-1 α기인적RNAi표체질립,이지질체LipofectamineTM 2000개도전염MCF-7세포.전염후48h,채용실시정량RT-PCR기술검측전염세포중HIF-1α mRNA적전록수평,사선유효적HIF-1 αRNAi질립；CCK-8법비교전염전후유선암세포증식변화,실시정량RT-PCR검측순활단백(SMO)mRNA표체.결과 성공구건함HIF-1α단발협상RNA(shRNA)1～4적RNAi표체질립,기중HIF-1 αshRNA-4간우억제효솔위74％,간우효과최강(P균＜0.05).HIF-1 αshRNA-4간우48、72、96 h후,MCF-7세포적생장억제솔명현승고(P균＜0.05).HIF-1αshRNA-4전염후MCF-7세포SMO mRNA적상대표체량위0.56 ±0.06,저우전염전적1.07 ±0.16(P ＜0.05).결론 HIF-1α표체가촉진유선암세포증식,가능여기삼여조공SMO적표체유관.
