中西医结合心脑血管病杂志
中西醫結閤心腦血管病雜誌
중서의결합심뇌혈관병잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATIVE MEDICINE ON CARDIO-/CEREBROVASCULAR DISEASE
2014年
3期
345-346
,共2页
李小东%郭庆%高璟英%张婉%武冬梅%刘云峰%章毅
李小東%郭慶%高璟英%張婉%武鼕梅%劉雲峰%章毅
리소동%곽경%고경영%장완%무동매%류운봉%장의
胰岛%分离%钙离子%原代大鼠
胰島%分離%鈣離子%原代大鼠
이도%분리%개리자%원대대서
目的 探讨成年大鼠胰岛分离、纯化的方法,为成人胰岛的分离纯化奠定基础.方法通过用胶原酶P消化胰腺及利用Histopaque 1077分离液离心分离纯化雄性SD大鼠胰岛,用双硫棕(DTZ)染色,吖啶橙-碘化丙啶(AO/PI)染色和胰岛素分泌实验来鉴定胰岛的纯度、活性和功能;利用激光共聚焦技术检测胰岛细胞中钙离子浓度.结果 分离获得的胰岛可被DTZ和AO/PI分别染成猩红色和绿色;体外刺激胰岛素分泌实验,2.8 mM、8.3 mM、16.7mM葡萄糖情况下胰岛素分泌量分别是:(11.7 ± 1.4)uIU/mL、(38.2 ± 8.7)uIU/mL、(86.3 ± 5.1)uIU/mL;在2.8 mM葡萄糖基础上,8.3 mM葡萄糖明显增加胰岛细胞中钙离子浓度,16.7 mM葡萄糖在8.3 mM葡萄糖基础上又进一步升高钙离子浓度.结论采用胶原酶P消化法及Histopaque 1077分离液离心分得的胰岛纯度高,活性、功能良好,随着葡萄糖浓度的增加,胰岛细胞中钙离子浓度明显增加.
目的 探討成年大鼠胰島分離、純化的方法,為成人胰島的分離純化奠定基礎.方法通過用膠原酶P消化胰腺及利用Histopaque 1077分離液離心分離純化雄性SD大鼠胰島,用雙硫棕(DTZ)染色,吖啶橙-碘化丙啶(AO/PI)染色和胰島素分泌實驗來鑒定胰島的純度、活性和功能;利用激光共聚焦技術檢測胰島細胞中鈣離子濃度.結果 分離穫得的胰島可被DTZ和AO/PI分彆染成猩紅色和綠色;體外刺激胰島素分泌實驗,2.8 mM、8.3 mM、16.7mM葡萄糖情況下胰島素分泌量分彆是:(11.7 ± 1.4)uIU/mL、(38.2 ± 8.7)uIU/mL、(86.3 ± 5.1)uIU/mL;在2.8 mM葡萄糖基礎上,8.3 mM葡萄糖明顯增加胰島細胞中鈣離子濃度,16.7 mM葡萄糖在8.3 mM葡萄糖基礎上又進一步升高鈣離子濃度.結論採用膠原酶P消化法及Histopaque 1077分離液離心分得的胰島純度高,活性、功能良好,隨著葡萄糖濃度的增加,胰島細胞中鈣離子濃度明顯增加.
목적 탐토성년대서이도분리、순화적방법,위성인이도적분리순화전정기출.방법통과용효원매P소화이선급이용Histopaque 1077분리액리심분리순화웅성SD대서이도,용쌍류종(DTZ)염색,아정등-전화병정(AO/PI)염색화이도소분비실험래감정이도적순도、활성화공능;이용격광공취초기술검측이도세포중개리자농도.결과 분리획득적이도가피DTZ화AO/PI분별염성성홍색화록색;체외자격이도소분비실험,2.8 mM、8.3 mM、16.7mM포도당정황하이도소분비량분별시:(11.7 ± 1.4)uIU/mL、(38.2 ± 8.7)uIU/mL、(86.3 ± 5.1)uIU/mL;재2.8 mM포도당기출상,8.3 mM포도당명현증가이도세포중개리자농도,16.7 mM포도당재8.3 mM포도당기출상우진일보승고개리자농도.결론채용효원매P소화법급Histopaque 1077분리액리심분득적이도순도고,활성、공능량호,수착포도당농도적증가,이도세포중개리자농도명현증가.
