白菜型冬油菜抗坏血酸过氧化物酶(APX)基因的克隆、表达及其活性分析
백채형동유채항배혈산과양화물매(APX)기인적극륭、표체급기활성분석
Cloning, Expression, and Activity Analysis of Ascorbate Peroxidase (APX)Gene from Winter Turnip Rape (Brassica campestris L.)
  • 万方数据
    作物学报 작물학보
    ACTA AGRONOMICA SINICA
    2013年 8期 1400-1408 ,共9页

    曾秀存%孙万仓%方彦%刘自刚%董云%孙佳%武军艳%张鹏飞%史鹏辉

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    Winter rape (Brassica compestris L.)%Lower temperature%APX gene cloning%Expression analysis%Activity of APX
    抗坏血酸过氧化物酶(APX)是一种在逆境条件下清除细胞内氧自由基、增强植物抗逆性的关键酶.本研究根据已发表植物抗坏血酸过氧化物酶基因APX的同源保守序列设计引物,采用RT-PCR扩增超强抗寒白菜型冬油菜陇油7号的DNA,获得APX基因开放阅读框,长度为753 bp,编码250个氨基酸残基,推导的氨基酸序列具有APX蛋白的典型特征.生物信息学分析显示,与已报道的大白菜的APX氨基酸序列同源性达99％,该酶蛋白具有高度的进化保守性,其保守序列属于植物的POD超家族,APX相对分子质量和理论等电点依次为27.7 kD和5.58; APX基因无信号肽,是一个亲水性蛋白,可推测其定位于细胞质中;二级结构预测表明陇油7号的APX是由不规则卷曲和α-螺旋组成的稳定蛋白.实时荧光定量PCR和酶活性分析显示,该基因表达和酶活性受低温胁迫诱导,表明该基因在白菜型冬油菜陇油7号适应低温胁迫过程中发挥重要作用.
    항배혈산과양화물매(APX)시일충재역경조건하청제세포내양자유기、증강식물항역성적관건매.본연구근거이발표식물항배혈산과양화물매기인APX적동원보수서렬설계인물,채용RT-PCR확증초강항한백채형동유채롱유7호적DNA,획득APX기인개방열독광,장도위753 bp,편마250개안기산잔기,추도적안기산서렬구유APX단백적전형특정.생물신식학분석현시,여이보도적대백채적APX안기산서렬동원성체99％,해매단백구유고도적진화보수성,기보수서렬속우식물적POD초가족,APX상대분자질량화이론등전점의차위27.7 kD화5.58; APX기인무신호태,시일개친수성단백,가추측기정위우세포질중;이급결구예측표명롱유7호적APX시유불규칙권곡화α-라선조성적은정단백.실시형광정량PCR화매활성분석현시,해기인표체화매활성수저온협박유도,표명해기인재백채형동유채롱유7호괄응저온협박과정중발휘중요작용.
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