中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2013年
10期
955-958,964
,共5页
王艳冬%宫雅楠%肖迪%张建中
王豔鼕%宮雅楠%肖迪%張建中
왕염동%궁아남%초적%장건중
幽门螺杆菌%蛋白%纯化%抗原性
幽門螺桿菌%蛋白%純化%抗原性
유문라간균%단백%순화%항원성
Helicobacter pylori%protein%purification%antigenicity
目的 构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)Ⅳ型分泌系统cagⅤ(hp0530)基因的原核表达系统,表达并纯化CagⅤ蛋白,初步分析其结构和抗原性,为进一步研究幽门螺杆菌的致病机制和治疗药物的筛选奠定基础.方法 以H.pylori ATCC700392株基因组为模板,采用聚合酶链反应(PCR)扩增获得目的片段,将其插入表达载体pET28a后转化大肠杆菌BL21(DE3),表达纯化后利用蛋白质印迹(Western blot)分析CagⅤ蛋白的抗原性.结果 双酶切鉴定结果证实cagⅤ基因重组表达载体构建成功；重组表达蛋白经飞行质谱鉴定为幽门螺杆菌CagⅤ蛋白；Western blot检测结果显示CagⅤ蛋白具有特异抗原性.结论 所克隆表达的CagⅤ蛋白具有较好的抗原性,对后续的的H.pylori致病性和检测、分析研究有比较重要的意义.
目的 構建幽門螺桿菌(Helicobacter pylori)Ⅳ型分泌繫統cagⅤ(hp0530)基因的原覈錶達繫統,錶達併純化CagⅤ蛋白,初步分析其結構和抗原性,為進一步研究幽門螺桿菌的緻病機製和治療藥物的篩選奠定基礎.方法 以H.pylori ATCC700392株基因組為模闆,採用聚閤酶鏈反應(PCR)擴增穫得目的片段,將其插入錶達載體pET28a後轉化大腸桿菌BL21(DE3),錶達純化後利用蛋白質印跡(Western blot)分析CagⅤ蛋白的抗原性.結果 雙酶切鑒定結果證實cagⅤ基因重組錶達載體構建成功；重組錶達蛋白經飛行質譜鑒定為幽門螺桿菌CagⅤ蛋白；Western blot檢測結果顯示CagⅤ蛋白具有特異抗原性.結論 所剋隆錶達的CagⅤ蛋白具有較好的抗原性,對後續的的H.pylori緻病性和檢測、分析研究有比較重要的意義.
목적 구건유문라간균(Helicobacter pylori)Ⅳ형분비계통cagⅤ(hp0530)기인적원핵표체계통,표체병순화CagⅤ단백,초보분석기결구화항원성,위진일보연구유문라간균적치병궤제화치료약물적사선전정기출.방법 이H.pylori ATCC700392주기인조위모판,채용취합매련반응(PCR)확증획득목적편단,장기삽입표체재체pET28a후전화대장간균BL21(DE3),표체순화후이용단백질인적(Western blot)분석CagⅤ단백적항원성.결과 쌍매절감정결과증실cagⅤ기인중조표체재체구건성공；중조표체단백경비행질보감정위유문라간균CagⅤ단백；Western blot검측결과현시CagⅤ단백구유특이항원성.결론 소극륭표체적CagⅤ단백구유교호적항원성,대후속적적H.pylori치병성화검측、분석연구유비교중요적의의.
