中华胃肠外科杂志
中華胃腸外科雜誌
중화위장외과잡지
CHINESE JOURNAL OF GASTROINTESTINAL SURGERY
2014年
1期
31-35
,共5页
方晓明%姜朝晖%彭佳萍%姚宁%方旭东%郑树
方曉明%薑朝暉%彭佳萍%姚寧%方旭東%鄭樹
방효명%강조휘%팽가평%요저%방욱동%정수
结直肠肿瘤%激酶4抑制因子家族基因%细胞增殖%细胞迁移
結直腸腫瘤%激酶4抑製因子傢族基因%細胞增殖%細胞遷移
결직장종류%격매4억제인자가족기인%세포증식%세포천이
Colorectal neoplasms%Inhibitros of kinace 4(INK4)%Cell proliferation%Cell migration
目的 探讨激活激酶4抑制因子(INK4)家族(P15ink4b和P16ink4a/CDKN2)基因表达对结肠癌细胞增殖和迁移能力的影响.方法 应用1×10-7、5×10-7及1×10-6 mol/L不同浓度的特异性DNA甲基转移酶抑制剂(5-Aza-CdR)对结肠癌RKO细胞进行去甲基化处理(分别为A、B、C3个实验组),另设阳性对照组(未经处理的RKO细胞).Western blot法检测INK4家族基因的蛋白表达;软琼脂克隆细胞集落实验评估体外致瘤情况;Transwell小室实验评估体外迁移情况.将各组RKO细胞注射BALB/c裸鼠(每组10只),通过称量瘤体的重量和体积评估体内成瘤情况.结果A、B、C3组实验组细胞中P15ink4b和P 16ink4a/CDKN2蛋白表达分别为阳性对照组的1.13、1.38、1.92倍和1.11、1.45、2.14倍.体外实验显示,B组和C组的细胞集落数明显少于阳性对照组(P＜0.05);3组实验组的细胞迁移数均明显少于阳性对照组(P＜0.05).体内实验显示,相对于阳性对照组,3组实验组裸鼠的抑瘤率分别为2.1％、16.8％和26.2％,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 激活INK4家族基因的表达能有效抑制结肠癌细胞的增殖和迁移.
目的 探討激活激酶4抑製因子(INK4)傢族(P15ink4b和P16ink4a/CDKN2)基因錶達對結腸癌細胞增殖和遷移能力的影響.方法 應用1×10-7、5×10-7及1×10-6 mol/L不同濃度的特異性DNA甲基轉移酶抑製劑(5-Aza-CdR)對結腸癌RKO細胞進行去甲基化處理(分彆為A、B、C3箇實驗組),另設暘性對照組(未經處理的RKO細胞).Western blot法檢測INK4傢族基因的蛋白錶達;軟瓊脂剋隆細胞集落實驗評估體外緻瘤情況;Transwell小室實驗評估體外遷移情況.將各組RKO細胞註射BALB/c裸鼠(每組10隻),通過稱量瘤體的重量和體積評估體內成瘤情況.結果A、B、C3組實驗組細胞中P15ink4b和P 16ink4a/CDKN2蛋白錶達分彆為暘性對照組的1.13、1.38、1.92倍和1.11、1.45、2.14倍.體外實驗顯示,B組和C組的細胞集落數明顯少于暘性對照組(P＜0.05);3組實驗組的細胞遷移數均明顯少于暘性對照組(P＜0.05).體內實驗顯示,相對于暘性對照組,3組實驗組裸鼠的抑瘤率分彆為2.1％、16.8％和26.2％,差異有統計學意義(P＜0.01).結論 激活INK4傢族基因的錶達能有效抑製結腸癌細胞的增殖和遷移.
목적 탐토격활격매4억제인자(INK4)가족(P15ink4b화P16ink4a/CDKN2)기인표체대결장암세포증식화천이능력적영향.방법 응용1×10-7、5×10-7급1×10-6 mol/L불동농도적특이성DNA갑기전이매억제제(5-Aza-CdR)대결장암RKO세포진행거갑기화처리(분별위A、B、C3개실험조),령설양성대조조(미경처리적RKO세포).Western blot법검측INK4가족기인적단백표체;연경지극륭세포집락실험평고체외치류정황;Transwell소실실험평고체외천이정황.장각조RKO세포주사BALB/c라서(매조10지),통과칭량류체적중량화체적평고체내성류정황.결과A、B、C3조실험조세포중P15ink4b화P 16ink4a/CDKN2단백표체분별위양성대조조적1.13、1.38、1.92배화1.11、1.45、2.14배.체외실험현시,B조화C조적세포집락수명현소우양성대조조(P＜0.05);3조실험조적세포천이수균명현소우양성대조조(P＜0.05).체내실험현시,상대우양성대조조,3조실험조라서적억류솔분별위2.1％、16.8％화26.2％,차이유통계학의의(P＜0.01).결론 격활INK4가족기인적표체능유효억제결장암세포적증식화천이.
