遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2013年
10期
1217-1225
,共9页
肖冬长%张智俊%徐英武%杨丽%张凤雪%王超莉
肖鼕長%張智俊%徐英武%楊麗%張鳳雪%王超莉
초동장%장지준%서영무%양려%장봉설%왕초리
毛竹%PeMYB2%非生物胁迫%转基因
毛竹%PeMYB2%非生物脅迫%轉基因
모죽%PeMYB2%비생물협박%전기인
Phyllostachys edulis%PeMYB2%abiotic stress%transgene
MYB类转录因子在调控逆境应答基因的表达起着重要的作用,是最大的植物转录因子之一.文章通过同源基因克隆方法和RACE(Rapid-amplification of cDNA ends)技术,以毛竹幼苗为材料,获得一个MYB类转录因子,命名PeMYB2.氨基酸序列分析表明,PeMYB2具有典型的R2R3-MYB特征,N端含有两个串联重复保守结构域,C端含有一个膜蛋白DUF3651;进化树分析表明,PeMYB2与水稻OsMYB 18序列相似性最高,达到85.98%;酵母单杂实验表明,PeMYB2具有转录激活功能.将PeMYB2转化拟南芥对其功能进行分析,获得7株转基因纯合体植株.比较转基因和野生型拟南芥表型发现,PeMYB2的过量表达使转基因拟南芥出现矮化、晚花的现象;非生物胁迫处理(盐胁迫、干旱胁迫、低温胁迫)结果表明,转基因拟南芥中PeMYB2的过量表达,导致转基因植株对盐胁迫和低温胁迫有更高的耐性,但是对低温胁迫的耐受性没有明显的变化;进一步通过盐胁迫信号通路相关Marker基因(NXH1、SOS1、RD29A、COR15A)的定量PCR实验验证,发现PeMYB2对下游这些抗逆基因的表达具有调控作用.上述实验结果表明,毛竹PeMYB2可参与非生物胁迫调控,对毛竹盐胁迫和低温胁迫的响应起着重要的作用.
MYB類轉錄因子在調控逆境應答基因的錶達起著重要的作用,是最大的植物轉錄因子之一.文章通過同源基因剋隆方法和RACE(Rapid-amplification of cDNA ends)技術,以毛竹幼苗為材料,穫得一箇MYB類轉錄因子,命名PeMYB2.氨基痠序列分析錶明,PeMYB2具有典型的R2R3-MYB特徵,N耑含有兩箇串聯重複保守結構域,C耑含有一箇膜蛋白DUF3651;進化樹分析錶明,PeMYB2與水稻OsMYB 18序列相似性最高,達到85.98%;酵母單雜實驗錶明,PeMYB2具有轉錄激活功能.將PeMYB2轉化擬南芥對其功能進行分析,穫得7株轉基因純閤體植株.比較轉基因和野生型擬南芥錶型髮現,PeMYB2的過量錶達使轉基因擬南芥齣現矮化、晚花的現象;非生物脅迫處理(鹽脅迫、榦旱脅迫、低溫脅迫)結果錶明,轉基因擬南芥中PeMYB2的過量錶達,導緻轉基因植株對鹽脅迫和低溫脅迫有更高的耐性,但是對低溫脅迫的耐受性沒有明顯的變化;進一步通過鹽脅迫信號通路相關Marker基因(NXH1、SOS1、RD29A、COR15A)的定量PCR實驗驗證,髮現PeMYB2對下遊這些抗逆基因的錶達具有調控作用.上述實驗結果錶明,毛竹PeMYB2可參與非生物脅迫調控,對毛竹鹽脅迫和低溫脅迫的響應起著重要的作用.
MYB류전록인자재조공역경응답기인적표체기착중요적작용,시최대적식물전록인자지일.문장통과동원기인극륭방법화RACE(Rapid-amplification of cDNA ends)기술,이모죽유묘위재료,획득일개MYB류전록인자,명명PeMYB2.안기산서렬분석표명,PeMYB2구유전형적R2R3-MYB특정,N단함유량개천련중복보수결구역,C단함유일개막단백DUF3651;진화수분석표명,PeMYB2여수도OsMYB 18서렬상사성최고,체도85.98%;효모단잡실험표명,PeMYB2구유전록격활공능.장PeMYB2전화의남개대기공능진행분석,획득7주전기인순합체식주.비교전기인화야생형의남개표형발현,PeMYB2적과량표체사전기인의남개출현왜화、만화적현상;비생물협박처리(염협박、간한협박、저온협박)결과표명,전기인의남개중PeMYB2적과량표체,도치전기인식주대염협박화저온협박유경고적내성,단시대저온협박적내수성몰유명현적변화;진일보통과염협박신호통로상관Marker기인(NXH1、SOS1、RD29A、COR15A)적정량PCR실험험증,발현PeMYB2대하유저사항역기인적표체구유조공작용.상술실험결과표명,모죽PeMYB2가삼여비생물협박조공,대모죽염협박화저온협박적향응기착중요적작용.