中国实验诊断学
中國實驗診斷學
중국실험진단학
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
2014年
1期
10-13
,共4页
张桐菲%王城坤%洪丽华%张志民
張桐菲%王城坤%洪麗華%張誌民
장동비%왕성곤%홍려화%장지민
siRNA%ffh基因%变形链球菌耐氟菌
siRNA%ffh基因%變形鏈毬菌耐氟菌
siRNA%ffh기인%변형련구균내불균
目的 筛选鉴定变形链球菌耐氟菌(UA159-FR)ffh基因的siRNA干扰序列.方法设计合成4段21 bp的核酸[1],利用电穿孔方法转入UA159-FR使其与ffh基因序列靶向位点结合.通过RT-PCR 和Real-time PCR技术验证靶向沉默ffh基因的效果,筛选出最佳siRNA干扰序列.结果倒置显微镜观察细菌电转效果正常.转染12 h内除siRNA1外其他3对siRNA都可以抑制ffh基因的表达,而在转染超过12 h达到24 h后,只有siRNA2可以更稳定的抑制ffh基因的表达.结论 siRNA干扰技术可以有效的沉默UA159-FR的ffh基因,siRNA2在沉默过程中效果较稳定.
目的 篩選鑒定變形鏈毬菌耐氟菌(UA159-FR)ffh基因的siRNA榦擾序列.方法設計閤成4段21 bp的覈痠[1],利用電穿孔方法轉入UA159-FR使其與ffh基因序列靶嚮位點結閤.通過RT-PCR 和Real-time PCR技術驗證靶嚮沉默ffh基因的效果,篩選齣最佳siRNA榦擾序列.結果倒置顯微鏡觀察細菌電轉效果正常.轉染12 h內除siRNA1外其他3對siRNA都可以抑製ffh基因的錶達,而在轉染超過12 h達到24 h後,隻有siRNA2可以更穩定的抑製ffh基因的錶達.結論 siRNA榦擾技術可以有效的沉默UA159-FR的ffh基因,siRNA2在沉默過程中效果較穩定.
목적 사선감정변형련구균내불균(UA159-FR)ffh기인적siRNA간우서렬.방법설계합성4단21 bp적핵산[1],이용전천공방법전입UA159-FR사기여ffh기인서렬파향위점결합.통과RT-PCR 화Real-time PCR기술험증파향침묵ffh기인적효과,사선출최가siRNA간우서렬.결과도치현미경관찰세균전전효과정상.전염12 h내제siRNA1외기타3대siRNA도가이억제ffh기인적표체,이재전염초과12 h체도24 h후,지유siRNA2가이경은정적억제ffh기인적표체.결론 siRNA간우기술가이유효적침묵UA159-FR적ffh기인,siRNA2재침묵과정중효과교은정.
