中国实验诊断学
中國實驗診斷學
중국실험진단학
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
2014年
1期
1-5
,共5页
沈洪远%张健%胡志刚%叶燕
瀋洪遠%張健%鬍誌剛%葉燕
침홍원%장건%호지강%협연
自身免疫性疾病%抗心磷脂抗体%时间分辨荧光免疫
自身免疫性疾病%抗心燐脂抗體%時間分辨熒光免疫
자신면역성질병%항심린지항체%시간분변형광면역
目的 建立高灵敏度、宽量程的定量检测患者血清中的抗心磷脂抗体(anticardiolipin antibody,ACA)IgG的Sm3+标记时间分辨荧光免疫分析方法.方法采用ACA抗原(心磷脂+β2 糖蛋白I)和兔抗人IgM抗体分别作为固相抗原和钐标记抗体,如果样本中存在ACA抗体,则形成ACA抗原-ACA抗体-钐标记兔抗人IgM抗体复合物,加入解离增强液解离铕离子,检测荧光强度,样本中ACA-IgM抗体含量与荧光强度成正比;对建立的时间分辨荧光免疫(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)法检测ACA抗体的线性范围、精密度、检测范围进行分析;对25例ACA-IgM抗体阳性血清标本分别利用TRFIA 及ELISA 法检测ACA-IgM抗体,分析其相关性;收集50例健康献血者,利用TRFIA检测其血清中的ACA-Ig抗体,计算临床特异度.结果利用SPSS 13.0统计软件进行统计学分析,TRFIA法检测高、中、低 3 种浓度混合血清的批内(n=20)精密度分别为2.39%、3.26% 和3.94%,批间(n=8)精密度分别为2.92%、3.73% 和4.35%;方法的灵敏度为0.1 MPL U/ml;TRFIA法检测健康献血者,临床特异度为98%;TRFIA 与ELISA 2种方法检测结果的一致性检验采用相关性分析,相关系数为0.956;将1份 ACA-IgM抗体强阳性的血清标本从2483 MPL U/L倍比稀释至0.151 MPL U/L,ELISA方法较好的线性范围在4.85-310.4 MPL U/L,而TRFIA方法在0.151-2483 MPL U/L都有较好的线性.结论 首次建立稳定的高灵敏度和宽检测范围的TRFIA法检测人血清中的ACA-IgM抗体,对早期诊断自身免疫性疾病及监测疗效具有重要意义,该方法以其优势有望在各检验科室得以普遍应用.
目的 建立高靈敏度、寬量程的定量檢測患者血清中的抗心燐脂抗體(anticardiolipin antibody,ACA)IgG的Sm3+標記時間分辨熒光免疫分析方法.方法採用ACA抗原(心燐脂+β2 糖蛋白I)和兔抗人IgM抗體分彆作為固相抗原和釤標記抗體,如果樣本中存在ACA抗體,則形成ACA抗原-ACA抗體-釤標記兔抗人IgM抗體複閤物,加入解離增彊液解離銪離子,檢測熒光彊度,樣本中ACA-IgM抗體含量與熒光彊度成正比;對建立的時間分辨熒光免疫(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)法檢測ACA抗體的線性範圍、精密度、檢測範圍進行分析;對25例ACA-IgM抗體暘性血清標本分彆利用TRFIA 及ELISA 法檢測ACA-IgM抗體,分析其相關性;收集50例健康獻血者,利用TRFIA檢測其血清中的ACA-Ig抗體,計算臨床特異度.結果利用SPSS 13.0統計軟件進行統計學分析,TRFIA法檢測高、中、低 3 種濃度混閤血清的批內(n=20)精密度分彆為2.39%、3.26% 和3.94%,批間(n=8)精密度分彆為2.92%、3.73% 和4.35%;方法的靈敏度為0.1 MPL U/ml;TRFIA法檢測健康獻血者,臨床特異度為98%;TRFIA 與ELISA 2種方法檢測結果的一緻性檢驗採用相關性分析,相關繫數為0.956;將1份 ACA-IgM抗體彊暘性的血清標本從2483 MPL U/L倍比稀釋至0.151 MPL U/L,ELISA方法較好的線性範圍在4.85-310.4 MPL U/L,而TRFIA方法在0.151-2483 MPL U/L都有較好的線性.結論 首次建立穩定的高靈敏度和寬檢測範圍的TRFIA法檢測人血清中的ACA-IgM抗體,對早期診斷自身免疫性疾病及鑑測療效具有重要意義,該方法以其優勢有望在各檢驗科室得以普遍應用.
목적 건립고령민도、관량정적정량검측환자혈청중적항심린지항체(anticardiolipin antibody,ACA)IgG적Sm3+표기시간분변형광면역분석방법.방법채용ACA항원(심린지+β2 당단백I)화토항인IgM항체분별작위고상항원화삼표기항체,여과양본중존재ACA항체,칙형성ACA항원-ACA항체-삼표기토항인IgM항체복합물,가입해리증강액해리유리자,검측형광강도,양본중ACA-IgM항체함량여형광강도성정비;대건립적시간분변형광면역(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)법검측ACA항체적선성범위、정밀도、검측범위진행분석;대25례ACA-IgM항체양성혈청표본분별이용TRFIA 급ELISA 법검측ACA-IgM항체,분석기상관성;수집50례건강헌혈자,이용TRFIA검측기혈청중적ACA-Ig항체,계산림상특이도.결과이용SPSS 13.0통계연건진행통계학분석,TRFIA법검측고、중、저 3 충농도혼합혈청적비내(n=20)정밀도분별위2.39%、3.26% 화3.94%,비간(n=8)정밀도분별위2.92%、3.73% 화4.35%;방법적령민도위0.1 MPL U/ml;TRFIA법검측건강헌혈자,림상특이도위98%;TRFIA 여ELISA 2충방법검측결과적일치성검험채용상관성분석,상관계수위0.956;장1빈 ACA-IgM항체강양성적혈청표본종2483 MPL U/L배비희석지0.151 MPL U/L,ELISA방법교호적선성범위재4.85-310.4 MPL U/L,이TRFIA방법재0.151-2483 MPL U/L도유교호적선성.결론 수차건립은정적고령민도화관검측범위적TRFIA법검측인혈청중적ACA-IgM항체,대조기진단자신면역성질병급감측료효구유중요의의,해방법이기우세유망재각검험과실득이보편응용.