中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2014年
1期
140-143
,共4页
张琴%杨发建%何芸%杨俊霞
張琴%楊髮建%何蕓%楊俊霞
장금%양발건%하예%양준하
Insig-2%启动子%药物筛选%报告基因载体%调脂药%荧光素酶法
Insig-2%啟動子%藥物篩選%報告基因載體%調脂藥%熒光素酶法
Insig-2%계동자%약물사선%보고기인재체%조지약%형광소매법
目的 通过双荧光素酶报告基因检测系统建立以胰岛素诱导基因2(insulin-induced gene 2,Insig-2)启动子为靶点的药物筛选模型.方法 将人Insig-2基因启动子序列克隆入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中,构建重组质粒 pGL3-Insig-2并与内参质粒 pRL-TK 瞬时共转染工具细胞,通过检测荧光素酶报告基因表达水平的变化反映Insig-2基因启动子启动转录的活性,并对共转染质粒比例、工具细胞选择等条件进行探索和优化,相关药物处理进行验证.结果 成功构建了重组质粒pGL3-Insig-2;确认pGL3-Insig-2:pRL-TK共转染比例为4:1,确定3T3-L1细胞为工具细胞;1,25-(OH)2D3、小檗碱和姜黄素均能明显增强Insig-2基因启动子活性.结论 成功建立了以Insig-2基因启动子为靶点的药物筛选模型,为筛选新型调脂药奠定基础.
目的 通過雙熒光素酶報告基因檢測繫統建立以胰島素誘導基因2(insulin-induced gene 2,Insig-2)啟動子為靶點的藥物篩選模型.方法 將人Insig-2基因啟動子序列剋隆入熒光素酶報告基因載體pGL3-basic中,構建重組質粒 pGL3-Insig-2併與內參質粒 pRL-TK 瞬時共轉染工具細胞,通過檢測熒光素酶報告基因錶達水平的變化反映Insig-2基因啟動子啟動轉錄的活性,併對共轉染質粒比例、工具細胞選擇等條件進行探索和優化,相關藥物處理進行驗證.結果 成功構建瞭重組質粒pGL3-Insig-2;確認pGL3-Insig-2:pRL-TK共轉染比例為4:1,確定3T3-L1細胞為工具細胞;1,25-(OH)2D3、小檗堿和薑黃素均能明顯增彊Insig-2基因啟動子活性.結論 成功建立瞭以Insig-2基因啟動子為靶點的藥物篩選模型,為篩選新型調脂藥奠定基礎.
목적 통과쌍형광소매보고기인검측계통건립이이도소유도기인2(insulin-induced gene 2,Insig-2)계동자위파점적약물사선모형.방법 장인Insig-2기인계동자서렬극륭입형광소매보고기인재체pGL3-basic중,구건중조질립 pGL3-Insig-2병여내삼질립 pRL-TK 순시공전염공구세포,통과검측형광소매보고기인표체수평적변화반영Insig-2기인계동자계동전록적활성,병대공전염질립비례、공구세포선택등조건진행탐색화우화,상관약물처리진행험증.결과 성공구건료중조질립pGL3-Insig-2;학인pGL3-Insig-2:pRL-TK공전염비례위4:1,학정3T3-L1세포위공구세포;1,25-(OH)2D3、소벽감화강황소균능명현증강Insig-2기인계동자활성.결론 성공건립료이Insig-2기인계동자위파점적약물사선모형,위사선신형조지약전정기출.
