中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2014年
1期
77-81
,共5页
汤蕾%胥甜甜%易小清%刘瑛%罗喻超%尹东%何明
湯蕾%胥甜甜%易小清%劉瑛%囉喻超%尹東%何明
탕뢰%서첨첨%역소청%류영%라유초%윤동%하명
葛根素%PKCε%缺氧/复氧%心肌保护%凋亡%线粒体膜电位
葛根素%PKCε%缺氧/複氧%心肌保護%凋亡%線粒體膜電位
갈근소%PKCε%결양/복양%심기보호%조망%선립체막전위
目的 探讨葛根素(puerarin,Pue)抗心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤保护作用与PKCε蛋白表达的关系.方法 培养新生SD大鼠原代心肌细胞,分为正常对照(Con)组、A/R组、葛根素+A/R(Pue+A/R)组、葛根素+抑制剂+A/R(Pue+εV1-2+A/R)组、抑制剂+A/R(εV1-2+A/R)组.Western blot测定PKCε蛋白表达水平,MTT法检测细胞存活率,比色法测定培养液肌酸磷酸酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性、细胞内丙二醛(MDA)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,流式细胞仪测定线粒体膜电位和细胞凋亡.结果 葛根素预处理24 h后,心肌细胞PKCε表达呈剂量依赖性上调(P<0.01);培养液CPK、LDH活性降低,细胞内SOD、GSH-Px活性升高,MDA含量减少,细胞存活率升高,细胞凋亡减少(P<0.01);PKCε抑制剂εV1-2则可明显消弱葛根素的上述心肌保护作用.结论 葛根素的抗心肌缺血/再灌注损伤保护作用涉及PKCε信号通路,至少部分依赖于其对PKCε表达水平的上调.
目的 探討葛根素(puerarin,Pue)抗心肌細胞缺氧/複氧(A/R)損傷保護作用與PKCε蛋白錶達的關繫.方法 培養新生SD大鼠原代心肌細胞,分為正常對照(Con)組、A/R組、葛根素+A/R(Pue+A/R)組、葛根素+抑製劑+A/R(Pue+εV1-2+A/R)組、抑製劑+A/R(εV1-2+A/R)組.Western blot測定PKCε蛋白錶達水平,MTT法檢測細胞存活率,比色法測定培養液肌痠燐痠酶(CPK)、乳痠脫氫酶(LDH)活性、細胞內丙二醛(MDA)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)、穀胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的活性,流式細胞儀測定線粒體膜電位和細胞凋亡.結果 葛根素預處理24 h後,心肌細胞PKCε錶達呈劑量依賴性上調(P<0.01);培養液CPK、LDH活性降低,細胞內SOD、GSH-Px活性升高,MDA含量減少,細胞存活率升高,細胞凋亡減少(P<0.01);PKCε抑製劑εV1-2則可明顯消弱葛根素的上述心肌保護作用.結論 葛根素的抗心肌缺血/再灌註損傷保護作用涉及PKCε信號通路,至少部分依賴于其對PKCε錶達水平的上調.
목적 탐토갈근소(puerarin,Pue)항심기세포결양/복양(A/R)손상보호작용여PKCε단백표체적관계.방법 배양신생SD대서원대심기세포,분위정상대조(Con)조、A/R조、갈근소+A/R(Pue+A/R)조、갈근소+억제제+A/R(Pue+εV1-2+A/R)조、억제제+A/R(εV1-2+A/R)조.Western blot측정PKCε단백표체수평,MTT법검측세포존활솔,비색법측정배양액기산린산매(CPK)、유산탈경매(LDH)활성、세포내병이철(MDA)적함량화초양화물기화매(SOD)、곡광감태과양화물매(GSH-Px)적활성,류식세포의측정선립체막전위화세포조망.결과 갈근소예처리24 h후,심기세포PKCε표체정제량의뢰성상조(P<0.01);배양액CPK、LDH활성강저,세포내SOD、GSH-Px활성승고,MDA함량감소,세포존활솔승고,세포조망감소(P<0.01);PKCε억제제εV1-2칙가명현소약갈근소적상술심기보호작용.결론 갈근소적항심기결혈/재관주손상보호작용섭급PKCε신호통로,지소부분의뢰우기대PKCε표체수평적상조.