浙江大学学报（医学版）
浙江大學學報（醫學版）
절강대학학보（의학판）
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY MEDICAL SCIENCES
2013年
5期
530-537
,共8页
李彤%郭美媛%马葵芬%杜悦%何良艳%朱丹雁%楼宜嘉
李彤%郭美媛%馬葵芬%杜悅%何良豔%硃丹雁%樓宜嘉
리동%곽미원%마규분%두열%하량염%주단안%루의가
胚胎干细胞%肝/解剖学和组织学%谷胱甘肽转移酶%微粒体,肝%葡糖醛酸基转移酶
胚胎榦細胞%肝/解剖學和組織學%穀胱甘肽轉移酶%微粒體,肝%葡糖醛痠基轉移酶
배태간세포%간/해부학화조직학%곡광감태전이매%미립체,간%포당철산기전이매
Embryonic stem cells%Liver/anatomy & histology%Glutathione transferase%Microsomes,Liver%Glucuronosyltransferase
目的:观察小鼠胚胎干细胞定向分化肝组织过程中,肝组织微粒体Ⅱ相代谢酶尿苷-5'-二磷酸葡醛酰转移酶(UGT)1 a1、1a6和微粒体谷胱甘肽S-转移酶1(mGST1)的表达及其催化活性.方法:利用拟胚体固有的三胚层结构,直接由中胚层心肌细胞产生成纤维细胞生长因子,自发诱导内胚层细胞发育,并由同步分化的内皮细胞支持肝细胞发育形成肝样组织.在不同分化阶段,基于mRNA表达情况,以Western blot法检测UGT1 a1、UGT1 a6和mGST1表达特征.至分化终点(第18天)以心肌细胞搏动区域附近表达肝特异性标记物白蛋白确定为肝细胞.超声法碎裂细胞,超速离心制备肝细胞微粒体,以HPLC检测UGTs代谢活性,以色谱法测定并计算mGST1酶催化活性.结果:至分化终点,小鼠胚胎干细胞衍生的肝组织表达UGT1 a1、UGT1 a6和mGST1,并具有UGT1 a1、UGT1 a6和mGST1的催化功能.其中分化第18天肝组织GST1催化活性为7.65 nmol·min-1 ·mg-1.结论:小鼠胚胎干细胞分化的肝组织具UGT1a1、UGT1a6和mGST1代谢功能,可望成为肝脏病理生理和药物Ⅱ相代谢研究的体外模型.
目的:觀察小鼠胚胎榦細胞定嚮分化肝組織過程中,肝組織微粒體Ⅱ相代謝酶尿苷-5'-二燐痠葡醛酰轉移酶(UGT)1 a1、1a6和微粒體穀胱甘肽S-轉移酶1(mGST1)的錶達及其催化活性.方法:利用擬胚體固有的三胚層結構,直接由中胚層心肌細胞產生成纖維細胞生長因子,自髮誘導內胚層細胞髮育,併由同步分化的內皮細胞支持肝細胞髮育形成肝樣組織.在不同分化階段,基于mRNA錶達情況,以Western blot法檢測UGT1 a1、UGT1 a6和mGST1錶達特徵.至分化終點(第18天)以心肌細胞搏動區域附近錶達肝特異性標記物白蛋白確定為肝細胞.超聲法碎裂細胞,超速離心製備肝細胞微粒體,以HPLC檢測UGTs代謝活性,以色譜法測定併計算mGST1酶催化活性.結果:至分化終點,小鼠胚胎榦細胞衍生的肝組織錶達UGT1 a1、UGT1 a6和mGST1,併具有UGT1 a1、UGT1 a6和mGST1的催化功能.其中分化第18天肝組織GST1催化活性為7.65 nmol·min-1 ·mg-1.結論:小鼠胚胎榦細胞分化的肝組織具UGT1a1、UGT1a6和mGST1代謝功能,可望成為肝髒病理生理和藥物Ⅱ相代謝研究的體外模型.
목적:관찰소서배태간세포정향분화간조직과정중,간조직미립체Ⅱ상대사매뇨감-5'-이린산포철선전이매(UGT)1 a1、1a6화미립체곡광감태S-전이매1(mGST1)적표체급기최화활성.방법:이용의배체고유적삼배층결구,직접유중배층심기세포산생성섬유세포생장인자,자발유도내배층세포발육,병유동보분화적내피세포지지간세포발육형성간양조직.재불동분화계단,기우mRNA표체정황,이Western blot법검측UGT1 a1、UGT1 a6화mGST1표체특정.지분화종점(제18천)이심기세포박동구역부근표체간특이성표기물백단백학정위간세포.초성법쇄렬세포,초속리심제비간세포미립체,이HPLC검측UGTs대사활성,이색보법측정병계산mGST1매최화활성.결과:지분화종점,소서배태간세포연생적간조직표체UGT1 a1、UGT1 a6화mGST1,병구유UGT1 a1、UGT1 a6화mGST1적최화공능.기중분화제18천간조직GST1최화활성위7.65 nmol·min-1 ·mg-1.결론:소서배태간세포분화적간조직구UGT1a1、UGT1a6화mGST1대사공능,가망성위간장병리생리화약물Ⅱ상대사연구적체외모형.
