浙江大学学报（医学版）
浙江大學學報（醫學版）
절강대학학보（의학판）
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY MEDICAL SCIENCES
2013年
5期
492-497
,共6页
张翀%周佳乐%方洁%张大勇%王宝明%陈瑞玲%潘建平
張翀%週佳樂%方潔%張大勇%王寶明%陳瑞玲%潘建平
장충%주가악%방길%장대용%왕보명%진서령%반건평
肠致病性大肠杆菌%内皮,血管%内皮细胞%脐静脉%线粒体%细胞凋亡%小鼠,基因敲除%细胞,培养的
腸緻病性大腸桿菌%內皮,血管%內皮細胞%臍靜脈%線粒體%細胞凋亡%小鼠,基因敲除%細胞,培養的
장치병성대장간균%내피,혈관%내피세포%제정맥%선립체%세포조망%소서,기인고제%세포,배양적
Enteropathogenic Escherichia coli%Endothelium,Vascular%Endothelial cells%Umbilical veins%Mitochondria%Apoptosis%Mice,Knockout%Cells,Cultured
目的:研究TcpC对人血管内皮细胞凋亡的影响及其机制,为阐明大肠埃希菌所致败血症的病理生理机制提供新的实验依据.方法:以人脐静脉内皮细胞作为研究对象,将表达TcpC的CFT073野生株(TcpCwt)和敲除tcpc基因的CFT073突变株(TcpCmut)与人脐静脉内皮细胞共培养;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡;JC-1染色法检测线粒体膜电位变化;Western blotting检测凋亡相关蛋白的表达.结果:TcpCwt与人脐静脉内皮细胞共培养24 h后,人脐静脉内皮细胞数量较少,有脱壁现象,且多数细胞呈碎片状.与TcpC mut相比,TcpCwt能显著诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡(P＜0.05).TcpCwt能显著降低人脐静脉内皮细胞线粒体膜电位,而TcpC mut处理的人脐静脉内皮细胞线粒体膜电位变化与空白对照差异无显著性意义.TcpC能增加多聚ADP核糖聚合酶蛋白裂解,抑制抗凋亡蛋白Mcl-1及XIAP的表达.结论:大肠埃希菌分泌的TcpC能通过线粒体途径引起多聚ADP核糖聚合酶切割,并抑制抑凋亡蛋白Mcl-1和XIAP的表达,诱导血管内皮细胞凋亡.
目的:研究TcpC對人血管內皮細胞凋亡的影響及其機製,為闡明大腸埃希菌所緻敗血癥的病理生理機製提供新的實驗依據.方法:以人臍靜脈內皮細胞作為研究對象,將錶達TcpC的CFT073野生株(TcpCwt)和敲除tcpc基因的CFT073突變株(TcpCmut)與人臍靜脈內皮細胞共培養;Annexin V/PI雙染法檢測細胞凋亡;JC-1染色法檢測線粒體膜電位變化;Western blotting檢測凋亡相關蛋白的錶達.結果:TcpCwt與人臍靜脈內皮細胞共培養24 h後,人臍靜脈內皮細胞數量較少,有脫壁現象,且多數細胞呈碎片狀.與TcpC mut相比,TcpCwt能顯著誘導人臍靜脈內皮細胞髮生凋亡(P＜0.05).TcpCwt能顯著降低人臍靜脈內皮細胞線粒體膜電位,而TcpC mut處理的人臍靜脈內皮細胞線粒體膜電位變化與空白對照差異無顯著性意義.TcpC能增加多聚ADP覈糖聚閤酶蛋白裂解,抑製抗凋亡蛋白Mcl-1及XIAP的錶達.結論:大腸埃希菌分泌的TcpC能通過線粒體途徑引起多聚ADP覈糖聚閤酶切割,併抑製抑凋亡蛋白Mcl-1和XIAP的錶達,誘導血管內皮細胞凋亡.
목적:연구TcpC대인혈관내피세포조망적영향급기궤제,위천명대장애희균소치패혈증적병리생리궤제제공신적실험의거.방법:이인제정맥내피세포작위연구대상,장표체TcpC적CFT073야생주(TcpCwt)화고제tcpc기인적CFT073돌변주(TcpCmut)여인제정맥내피세포공배양;Annexin V/PI쌍염법검측세포조망;JC-1염색법검측선립체막전위변화;Western blotting검측조망상관단백적표체.결과:TcpCwt여인제정맥내피세포공배양24 h후,인제정맥내피세포수량교소,유탈벽현상,차다수세포정쇄편상.여TcpC mut상비,TcpCwt능현저유도인제정맥내피세포발생조망(P＜0.05).TcpCwt능현저강저인제정맥내피세포선립체막전위,이TcpC mut처리적인제정맥내피세포선립체막전위변화여공백대조차이무현저성의의.TcpC능증가다취ADP핵당취합매단백렬해,억제항조망단백Mcl-1급XIAP적표체.결론:대장애희균분비적TcpC능통과선립체도경인기다취ADP핵당취합매절할,병억제억조망단백Mcl-1화XIAP적표체,유도혈관내피세포조망.
