浙江工业大学学报
浙江工業大學學報
절강공업대학학보
Journal of Zhejiang University of Technology
2014年
2期
172-177
,共6页
梅建凤%罗丽琴%王鸿%钱捷%应国清
梅建鳳%囉麗琴%王鴻%錢捷%應國清
매건봉%라려금%왕홍%전첩%응국청
胸苷%化学—酶法合成%结晶诱导不对称转化%核苷磷酸化酶
胸苷%化學—酶法閤成%結晶誘導不對稱轉化%覈苷燐痠化酶
흉감%화학—매법합성%결정유도불대칭전화%핵감린산화매
thymidine%chemo-enzymatic synthesis%crystallization-induced asymmetric transformation%nucleoside phosphorylase
核苷及其衍生物在抗肿瘤、抗病毒方面具有广泛应用,如何高效绿色合成核苷一直是研究的重点.现以1-氯-2-脱氧-3',5'-二-o对氯苯甲酰基-D-核糖(化合物Ⅰ)为起始原料,采用结晶诱导不对称转化技术合成中间体2-脱氧-α-n核糖-1-磷酸二环己胺盐(化合物Ⅲ),然后以化合物Ⅲ和胸腺嘧啶作为底物,利用大肠杆菌(Escherichia coli)核苷磷酸化酶的催化作用合成胸苷.结果显示:化学法合成化合物Ⅲ获得较高的收率,可达到84.9％,纯度为94.7％;最佳生物酶催化反应条件:底物浓度为化合物Ⅲ100 mmol/L,胸腺嘧啶400 mmol/L;菌体量为80 g/L;缓冲液pH 8,反应温度55℃,反应时间4h,转化率达到61.8％.最后,采用柱层析法分离得到胸苷,收率和纯度分别为49.7％和95.3％.该方法具有高选择、高效性及少污染的优点.
覈苷及其衍生物在抗腫瘤、抗病毒方麵具有廣汎應用,如何高效綠色閤成覈苷一直是研究的重點.現以1-氯-2-脫氧-3',5'-二-o對氯苯甲酰基-D-覈糖(化閤物Ⅰ)為起始原料,採用結晶誘導不對稱轉化技術閤成中間體2-脫氧-α-n覈糖-1-燐痠二環己胺鹽(化閤物Ⅲ),然後以化閤物Ⅲ和胸腺嘧啶作為底物,利用大腸桿菌(Escherichia coli)覈苷燐痠化酶的催化作用閤成胸苷.結果顯示:化學法閤成化閤物Ⅲ穫得較高的收率,可達到84.9％,純度為94.7％;最佳生物酶催化反應條件:底物濃度為化閤物Ⅲ100 mmol/L,胸腺嘧啶400 mmol/L;菌體量為80 g/L;緩遲液pH 8,反應溫度55℃,反應時間4h,轉化率達到61.8％.最後,採用柱層析法分離得到胸苷,收率和純度分彆為49.7％和95.3％.該方法具有高選擇、高效性及少汙染的優點.
핵감급기연생물재항종류、항병독방면구유엄범응용,여하고효록색합성핵감일직시연구적중점.현이1-록-2-탈양-3',5'-이-o대록분갑선기-D-핵당(화합물Ⅰ)위기시원료,채용결정유도불대칭전화기술합성중간체2-탈양-α-n핵당-1-린산이배기알염(화합물Ⅲ),연후이화합물Ⅲ화흉선밀정작위저물,이용대장간균(Escherichia coli)핵감린산화매적최화작용합성흉감.결과현시:화학법합성화합물Ⅲ획득교고적수솔,가체도84.9％,순도위94.7％;최가생물매최화반응조건:저물농도위화합물Ⅲ100 mmol/L,흉선밀정400 mmol/L;균체량위80 g/L;완충액pH 8,반응온도55℃,반응시간4h,전화솔체도61.8％.최후,채용주층석법분리득도흉감,수솔화순도분별위49.7％화95.3％.해방법구유고선택、고효성급소오염적우점.
