江苏大学学报（医学版）
江囌大學學報（醫學版）
강소대학학보（의학판）
JOURNAL OF JIANGSU UNIVERSITY (MEDICINE EDITION)
2013年
5期
402-406
,共5页
焦霞%朱晓蔚%李顺龙%戴桂红%蒋小芹%姚娟%肖蔚%于鸿
焦霞%硃曉蔚%李順龍%戴桂紅%蔣小芹%姚娟%肖蔚%于鴻
초하%주효위%리순룡%대계홍%장소근%요연%초위%우홍
N-myc下游调节基因1%P21%鼠双微体基因2%细胞增殖%细胞凋亡
N-myc下遊調節基因1%P21%鼠雙微體基因2%細胞增殖%細胞凋亡
N-myc하유조절기인1%P21%서쌍미체기인2%세포증식%세포조망
N-myc downstream regulated gene 1%P21%murine doubleminute 2%cell proliferation%cell apoptosis
目的:建立稳定转染N-myc下游调节基因1(N-myc downstream-regulated gene 1,NDRG1)的A549细胞株,探讨NDRG1对A549细胞增殖与凋亡的影响及其可能的分子机制.方法:经脂质体介导将含有NDRG1的重组表达质粒转染人肺腺癌A549细胞株,采用G418筛选阳性细胞克隆并进行实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白质印迹鉴定;qRT-PCR和蛋白质印迹检测阳性细胞克隆P21及鼠双微体基因2(murine doubleminute 2,MDM2)的表达;MTT比色法检测阳性细胞克隆的增殖活性;流式细胞仪检测阳性细胞克隆凋亡率.结果:成功建立高表达NDRG1的阳性A549细胞克隆(N11);N11细胞P21表达及细胞凋亡率显著增高(P＜0.05),而MDM2表达及细胞增殖显著降低(P＜0.05).结论:上调A549细胞NDRG1表达后,细胞凋亡增加而细胞增殖降低,其作用机制可能与P21表达增高而MDM2表达降低有关.
目的:建立穩定轉染N-myc下遊調節基因1(N-myc downstream-regulated gene 1,NDRG1)的A549細胞株,探討NDRG1對A549細胞增殖與凋亡的影響及其可能的分子機製.方法:經脂質體介導將含有NDRG1的重組錶達質粒轉染人肺腺癌A549細胞株,採用G418篩選暘性細胞剋隆併進行實時熒光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白質印跡鑒定;qRT-PCR和蛋白質印跡檢測暘性細胞剋隆P21及鼠雙微體基因2(murine doubleminute 2,MDM2)的錶達;MTT比色法檢測暘性細胞剋隆的增殖活性;流式細胞儀檢測暘性細胞剋隆凋亡率.結果:成功建立高錶達NDRG1的暘性A549細胞剋隆(N11);N11細胞P21錶達及細胞凋亡率顯著增高(P＜0.05),而MDM2錶達及細胞增殖顯著降低(P＜0.05).結論:上調A549細胞NDRG1錶達後,細胞凋亡增加而細胞增殖降低,其作用機製可能與P21錶達增高而MDM2錶達降低有關.
목적:건립은정전염N-myc하유조절기인1(N-myc downstream-regulated gene 1,NDRG1)적A549세포주,탐토NDRG1대A549세포증식여조망적영향급기가능적분자궤제.방법:경지질체개도장함유NDRG1적중조표체질립전염인폐선암A549세포주,채용G418사선양성세포극륭병진행실시형광정량PCR(qRT-PCR)、단백질인적감정;qRT-PCR화단백질인적검측양성세포극륭P21급서쌍미체기인2(murine doubleminute 2,MDM2)적표체;MTT비색법검측양성세포극륭적증식활성;류식세포의검측양성세포극륭조망솔.결과:성공건립고표체NDRG1적양성A549세포극륭(N11);N11세포P21표체급세포조망솔현저증고(P＜0.05),이MDM2표체급세포증식현저강저(P＜0.05).결론:상조A549세포NDRG1표체후,세포조망증가이세포증식강저,기작용궤제가능여P21표체증고이MDM2표체강저유관.
