江苏大学学报(医学版)
江囌大學學報(醫學版)
강소대학학보(의학판)
JOURNAL OF JIANGSU UNIVERSITY (MEDICINE EDITION)
2013年
5期
382-384,388
,共4页
党胜春%陈纪芳%冯舒%刘彬%王平江%张建新
黨勝春%陳紀芳%馮舒%劉彬%王平江%張建新
당성춘%진기방%풍서%류빈%왕평강%장건신
骨髓%内皮祖细胞%体外培养%鉴定
骨髓%內皮祖細胞%體外培養%鑒定
골수%내피조세포%체외배양%감정
bone marrow%endothelial progenitor cells%cultured in vitro%identification
目的:探讨小鼠骨髓来源的血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的体外培养、诱导分化及表面标志物的鉴别.方法:收集ICR小鼠骨髓EPCs,Ficoll分离单核细胞,使用含有血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)的培养基培养.分别在细胞培养5,10,15及20 d后检测细胞表面的内皮细胞标志物.结果:培养5d后细胞开始出现上皮细胞的形态,有伪足出现;培养10 d,细胞开始增殖,成圆形,出现梭形细胞;培养15d,细胞出现较为典型的内皮细胞形态,铺路石状;培养20 d,细胞出现长梭形拉网状,即类似成熟内皮细胞形态.免疫荧光染色及流式定量检测结果显示,CD34在EPCs中的表达随培养时间延长有渐变减弱的趋势;血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)在EPCs的表达随培养时间延长有渐变增强的趋势.结论:骨髓EPCs在特定诱导条件下可分化出典型的成熟内皮细胞,取材方便,扩增能力较强.
目的:探討小鼠骨髓來源的血管內皮祖細胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的體外培養、誘導分化及錶麵標誌物的鑒彆.方法:收集ICR小鼠骨髓EPCs,Ficoll分離單覈細胞,使用含有血管內皮生長因子(VEGF)、成纖維細胞生長因子(FGF)的培養基培養.分彆在細胞培養5,10,15及20 d後檢測細胞錶麵的內皮細胞標誌物.結果:培養5d後細胞開始齣現上皮細胞的形態,有偽足齣現;培養10 d,細胞開始增殖,成圓形,齣現梭形細胞;培養15d,細胞齣現較為典型的內皮細胞形態,鋪路石狀;培養20 d,細胞齣現長梭形拉網狀,即類似成熟內皮細胞形態.免疫熒光染色及流式定量檢測結果顯示,CD34在EPCs中的錶達隨培養時間延長有漸變減弱的趨勢;血管內皮生長因子受體-2(VEGFR-2)在EPCs的錶達隨培養時間延長有漸變增彊的趨勢.結論:骨髓EPCs在特定誘導條件下可分化齣典型的成熟內皮細胞,取材方便,擴增能力較彊.
목적:탐토소서골수래원적혈관내피조세포(endothelial progenitor cells,EPCs)적체외배양、유도분화급표면표지물적감별.방법:수집ICR소서골수EPCs,Ficoll분리단핵세포,사용함유혈관내피생장인자(VEGF)、성섬유세포생장인자(FGF)적배양기배양.분별재세포배양5,10,15급20 d후검측세포표면적내피세포표지물.결과:배양5d후세포개시출현상피세포적형태,유위족출현;배양10 d,세포개시증식,성원형,출현사형세포;배양15d,세포출현교위전형적내피세포형태,포로석상;배양20 d,세포출현장사형랍망상,즉유사성숙내피세포형태.면역형광염색급류식정량검측결과현시,CD34재EPCs중적표체수배양시간연장유점변감약적추세;혈관내피생장인자수체-2(VEGFR-2)재EPCs적표체수배양시간연장유점변증강적추세.결론:골수EPCs재특정유도조건하가분화출전형적성숙내피세포,취재방편,확증능력교강.