中南大学学报（医学版）
中南大學學報（醫學版）
중남대학학보（의학판）
JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCES)
2014年
1期
36-42
,共7页
HMGB1%RNA干扰%子宫内膜癌细胞%侵袭%迁移
HMGB1%RNA榦擾%子宮內膜癌細胞%侵襲%遷移
HMGB1%RNA간우%자궁내막암세포%침습%천이
HMGB1%RNA interference%endometrial carcinoma%invasion%migration
目的:探讨靶向HMGB1的shRNA对HMGB1表达改变的影响及其与子宫内膜癌细胞侵袭与迁移力改变的关系.方法:运用RNA干扰技术,构建HMGB1短发夹RNA(pshRNA-1 /HMGB1,pshRNA-2/HMGB1,pshRNA-3/HMGB1),同时设置转染非特异性质粒的阴性对照组(HMGB1/p-NC)和脂质体转染组(Lipo组),用脂质体法转染人子宫内膜癌细胞(HEC-1A),利用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法检测转染后48 h各组细胞HMGB1在mRNA和蛋白水平的表达,Transwell小室法观察转染HMGB1 shRNA后HEC-1A细胞的侵袭情况,细胞划痕实验观察转染HMGB1 shRNA后HEC-1A细胞的迁移情况.结果:RT-PCR显示:3组重组质粒HMGB 1-pshRNAs转染后,HMGB1 mRNA相对表达水平分别是0.192±0.006,0.055±0.002和0.123±0.086,较Lipo组(0.268±0.008)和HMGB1/p-NC组(0.270±0.004)明显减少(P＜0.05),最大抑制率分别达28.4％,79.5％和54.1％.Western印迹显示:HMGB1蛋白相对表达水平分别是0.259±0.129.0.032±0.002和0.104±0.007,较Lipo组(0.347±0.007)和HMGB1/p-NC组(0.349±0.007)明显减少(P＜0.05),最大抑制率分别达25.4％,90.8％和70.0％.实验组在接种后48 h,穿过Transwell小室膜的细胞数显著少于HMGB1/p-NC组和Lipo组(P＜0.05).划痕愈合实验亦显示实验组划痕愈合率明显低于HMGB1/p-NC组和Lipo组(P＜0.05).结论:靶向干扰HMGB1的shRNA可以抑制HMGB1的表达,转染后的子宫内膜癌细胞侵袭与迁移能力明显下降.
目的:探討靶嚮HMGB1的shRNA對HMGB1錶達改變的影響及其與子宮內膜癌細胞侵襲與遷移力改變的關繫.方法:運用RNA榦擾技術,構建HMGB1短髮夾RNA(pshRNA-1 /HMGB1,pshRNA-2/HMGB1,pshRNA-3/HMGB1),同時設置轉染非特異性質粒的陰性對照組(HMGB1/p-NC)和脂質體轉染組(Lipo組),用脂質體法轉染人子宮內膜癌細胞(HEC-1A),利用反轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)和Western印跡法檢測轉染後48 h各組細胞HMGB1在mRNA和蛋白水平的錶達,Transwell小室法觀察轉染HMGB1 shRNA後HEC-1A細胞的侵襲情況,細胞劃痕實驗觀察轉染HMGB1 shRNA後HEC-1A細胞的遷移情況.結果:RT-PCR顯示:3組重組質粒HMGB 1-pshRNAs轉染後,HMGB1 mRNA相對錶達水平分彆是0.192±0.006,0.055±0.002和0.123±0.086,較Lipo組(0.268±0.008)和HMGB1/p-NC組(0.270±0.004)明顯減少(P＜0.05),最大抑製率分彆達28.4％,79.5％和54.1％.Western印跡顯示:HMGB1蛋白相對錶達水平分彆是0.259±0.129.0.032±0.002和0.104±0.007,較Lipo組(0.347±0.007)和HMGB1/p-NC組(0.349±0.007)明顯減少(P＜0.05),最大抑製率分彆達25.4％,90.8％和70.0％.實驗組在接種後48 h,穿過Transwell小室膜的細胞數顯著少于HMGB1/p-NC組和Lipo組(P＜0.05).劃痕愈閤實驗亦顯示實驗組劃痕愈閤率明顯低于HMGB1/p-NC組和Lipo組(P＜0.05).結論:靶嚮榦擾HMGB1的shRNA可以抑製HMGB1的錶達,轉染後的子宮內膜癌細胞侵襲與遷移能力明顯下降.
목적:탐토파향HMGB1적shRNA대HMGB1표체개변적영향급기여자궁내막암세포침습여천이력개변적관계.방법:운용RNA간우기술,구건HMGB1단발협RNA(pshRNA-1 /HMGB1,pshRNA-2/HMGB1,pshRNA-3/HMGB1),동시설치전염비특이성질립적음성대조조(HMGB1/p-NC)화지질체전염조(Lipo조),용지질체법전염인자궁내막암세포(HEC-1A),이용반전록-취합매련반응(RT-PCR)화Western인적법검측전염후48 h각조세포HMGB1재mRNA화단백수평적표체,Transwell소실법관찰전염HMGB1 shRNA후HEC-1A세포적침습정황,세포화흔실험관찰전염HMGB1 shRNA후HEC-1A세포적천이정황.결과:RT-PCR현시:3조중조질립HMGB 1-pshRNAs전염후,HMGB1 mRNA상대표체수평분별시0.192±0.006,0.055±0.002화0.123±0.086,교Lipo조(0.268±0.008)화HMGB1/p-NC조(0.270±0.004)명현감소(P＜0.05),최대억제솔분별체28.4％,79.5％화54.1％.Western인적현시:HMGB1단백상대표체수평분별시0.259±0.129.0.032±0.002화0.104±0.007,교Lipo조(0.347±0.007)화HMGB1/p-NC조(0.349±0.007)명현감소(P＜0.05),최대억제솔분별체25.4％,90.8％화70.0％.실험조재접충후48 h,천과Transwell소실막적세포수현저소우HMGB1/p-NC조화Lipo조(P＜0.05).화흔유합실험역현시실험조화흔유합솔명현저우HMGB1/p-NC조화Lipo조(P＜0.05).결론:파향간우HMGB1적shRNA가이억제HMGB1적표체,전염후적자궁내막암세포침습여천이능력명현하강.
