中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2014年
3期
214-217
,共4页
安伟%肖雨%张崇文%张明辉%何正侃
安偉%肖雨%張崇文%張明輝%何正侃
안위%초우%장숭문%장명휘%하정간
鳜鱼%传染性脾肾坏死病毒%荧光定量PCR反应
鱖魚%傳染性脾腎壞死病毒%熒光定量PCR反應
궐어%전염성비신배사병독%형광정량PCR반응
Siniperca chuatsi%infectious spleen and kidney necrosis virus%qPCR
为了建立检测鳜鱼传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)的方法,本研究根据GenBank中ISKNV MCP基因的保守序列设计并合成1对引物和1条TaqMan探针,建立了该病毒的TaqMan荧光定量PCR检测方法.结果表明,以重组质粒标准品构建的标准曲线的相关系数为0.994,具有良好的线性关系,检测下限为20拷贝/μL,是常规PCR的1 000倍;特异性强,只有ISKNV呈阳性,而与流行性造血器官坏死病毒、鲤春病毒血症病毒和草鱼呼肠孤病毒均无交叉反应;重复性好,批内和批间的变异系数均小于0.7％.本研究建立的ISKNV TaqMan荧光定量PCR方法对ISKNV的快速检测及定量检测具有重要意义.
為瞭建立檢測鱖魚傳染性脾腎壞死病毒(ISKNV)的方法,本研究根據GenBank中ISKNV MCP基因的保守序列設計併閤成1對引物和1條TaqMan探針,建立瞭該病毒的TaqMan熒光定量PCR檢測方法.結果錶明,以重組質粒標準品構建的標準麯線的相關繫數為0.994,具有良好的線性關繫,檢測下限為20拷貝/μL,是常規PCR的1 000倍;特異性彊,隻有ISKNV呈暘性,而與流行性造血器官壞死病毒、鯉春病毒血癥病毒和草魚呼腸孤病毒均無交扠反應;重複性好,批內和批間的變異繫數均小于0.7％.本研究建立的ISKNV TaqMan熒光定量PCR方法對ISKNV的快速檢測及定量檢測具有重要意義.
위료건립검측궐어전염성비신배사병독(ISKNV)적방법,본연구근거GenBank중ISKNV MCP기인적보수서렬설계병합성1대인물화1조TaqMan탐침,건립료해병독적TaqMan형광정량PCR검측방법.결과표명,이중조질립표준품구건적표준곡선적상관계수위0.994,구유량호적선성관계,검측하한위20고패/μL,시상규PCR적1 000배;특이성강,지유ISKNV정양성,이여류행성조혈기관배사병독、리춘병독혈증병독화초어호장고병독균무교차반응;중복성호,비내화비간적변이계수균소우0.7％.본연구건립적ISKNV TaqMan형광정량PCR방법대ISKNV적쾌속검측급정량검측구유중요의의.
