中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2013年
10期
941-945
,共5页
贾引军%熊小路%王锡乐%齐永%焦俊%段长松%龚文平%温博海
賈引軍%熊小路%王錫樂%齊永%焦俊%段長鬆%龔文平%溫博海
가인군%웅소로%왕석악%제영%초준%단장송%공문평%온박해
普氏立克次体%主要抗原%重组蛋白%免疫印迹
普氏立剋次體%主要抗原%重組蛋白%免疫印跡
보씨립극차체%주요항원%중조단백%면역인적
Rickettsia prowazekii%major antigen%recombinant protein%immunoblotting
目的 克隆与表达普氏立克次体(Rickettesia prowazekii)主要蛋白抗原基因,分析所表达重组蛋白的抗原特异性.方法 采用PCR法从普氏立克次体全基因组中扩增其主要抗原基因,将扩得的基因片段插入原核表达质粒；将基因重组表达质粒转化大肠杆菌,用IPTG诱导转化菌表达重组蛋白.将普氏立克次体、莫氏立克次体、立氏立克次体、恙虫病东方体、黑龙江立克次体、贝氏柯克斯体等实验感染小鼠血清与重组蛋白做免疫印迹.结果 经过PCR扩增后获得9个目的基因片段,用其构建出9个原核表达质粒；9个原核表达质粒转化菌均高效表达出相应的重组蛋白；结果显示FtsZ、GroEL、Rp828、EF-Ts等4个蛋白特异性最好,仅与普氏立克次体感染小鼠血清反应；其次是Omp,它除与普氏立克次体感染小鼠血清反应外,仅与莫氏立克次体感染血清反应.结论 FtsZ等4个重组蛋白为普氏立克次体的特异性抗原,可以作为研制流行性斑疹伤寒血清学诊断试剂的候选抗原.
目的 剋隆與錶達普氏立剋次體(Rickettesia prowazekii)主要蛋白抗原基因,分析所錶達重組蛋白的抗原特異性.方法 採用PCR法從普氏立剋次體全基因組中擴增其主要抗原基因,將擴得的基因片段插入原覈錶達質粒；將基因重組錶達質粒轉化大腸桿菌,用IPTG誘導轉化菌錶達重組蛋白.將普氏立剋次體、莫氏立剋次體、立氏立剋次體、恙蟲病東方體、黑龍江立剋次體、貝氏柯剋斯體等實驗感染小鼠血清與重組蛋白做免疫印跡.結果 經過PCR擴增後穫得9箇目的基因片段,用其構建齣9箇原覈錶達質粒；9箇原覈錶達質粒轉化菌均高效錶達齣相應的重組蛋白；結果顯示FtsZ、GroEL、Rp828、EF-Ts等4箇蛋白特異性最好,僅與普氏立剋次體感染小鼠血清反應；其次是Omp,它除與普氏立剋次體感染小鼠血清反應外,僅與莫氏立剋次體感染血清反應.結論 FtsZ等4箇重組蛋白為普氏立剋次體的特異性抗原,可以作為研製流行性斑疹傷寒血清學診斷試劑的候選抗原.
목적 극륭여표체보씨립극차체(Rickettesia prowazekii)주요단백항원기인,분석소표체중조단백적항원특이성.방법 채용PCR법종보씨립극차체전기인조중확증기주요항원기인,장확득적기인편단삽입원핵표체질립；장기인중조표체질립전화대장간균,용IPTG유도전화균표체중조단백.장보씨립극차체、막씨립극차체、립씨립극차체、양충병동방체、흑룡강립극차체、패씨가극사체등실험감염소서혈청여중조단백주면역인적.결과 경과PCR확증후획득9개목적기인편단,용기구건출9개원핵표체질립；9개원핵표체질립전화균균고효표체출상응적중조단백；결과현시FtsZ、GroEL、Rp828、EF-Ts등4개단백특이성최호,부여보씨립극차체감염소서혈청반응；기차시Omp,타제여보씨립극차체감염소서혈청반응외,부여막씨립극차체감염혈청반응.결론 FtsZ등4개중조단백위보씨립극차체적특이성항원,가이작위연제류행성반진상한혈청학진단시제적후선항원.
