CAJ | 학술논문

目的：研究乙肝病毒/黄曲霉毒素B1双暴露相关性肝细胞性肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）染色体遗传学畸变的特点。方法将32例手术切除经病理证实为HCC的癌组织，按照乙肝病毒与黄曲霉毒素的暴露情况分为4个亚组：A组为HBV（+）/AFB1（+）10例；B组为HBV（+）/AFB1（-）10例；C组为HBV（-）/AFB1（+）6例；D组为HBV（-）/AFB1（-）6例。应用微阵列比较基因组杂交技术（Array CGH）检测分析其22对染色体DNA拷贝数的变化。结果32例HCC样本中，共发现573个染色体畸变区段（chromosomal aberrations，CNAs）。其中1q、4p、5p、6p、7p、8q、10p、17q、20p、20q和X主要表现为扩增区段；1p、2q、4q、8p、9p、10q、11q、13q、14q、16p、16q、17p、19p、19q、21q、22q和Y主要表现为缺失区段。同时，共检测出25个染色体发生高频畸变的区段（recurrently altered regions，RARs)，其中1q21.1-q44、5p13.2-p15.3、6p12.1-p25.2、7q11.2-q35、8q11.2-q24.3、17q12-q25.2、18q12.3-q22.3和 X 为高频率扩增区段，而1p31.1-p36.2、2q23.2-q37.2、4q12-q35.2、6q14.1-q26、8p12-p23.2、9p21.1-p24.2、10q21.3-q26.2、13q12.1-q21.1、14q21.3-q32.2、16p12.1-p13.2、16q12.1-q24.1、17p12-p13.3、19p13.1-p13.3、19q13.2-q13.4、21q21.3-q22.2、22q11.2-q13.2和Y染色体为高频缺失区段。8p12-p23.2缺失的发生率在进展期HCC(TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期)中明显高于早期HCC (TNM分期为I~II期)（P=0.038）。4q12-q35.2、13q12.1-q21.1的缺失及7q21.1-q35的扩增发生率在A组中最高。Cox模型分析结果示：在单因素分析中AFP水平、肿瘤大小、TNM分期、BCLC分期、侵袭与转移的发生、8p12-p23.2的缺失以及19p13.1-p13.3的缺失等为影响患者无瘤生存时间的危险因素（P<0.05）。而在多因素分析中AFP水平、TNM分期以及8p12-p23.2的缺失等为影响患者无瘤生存时间的危险因素（P<0.05）。结论广西地区HCC染色体遗传学改变具有多样性，其中染色体19p13.1-p13.3的高频缺失可能为广西地区HCC特有的分子生物学特征之一。染色体8p12-p23.2的缺失可能为HCC的晚期事件，并且与患者的不良预后有关。染色体4q12-q35.2、13q12.1-q21.1缺失及7q21.1-q35扩增可能与HBV/AFB1双因素的协同致癌作用有关。目的：研究乙肝病毒/黃麯黴毒素B1雙暴露相關性肝細胞性肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）染色體遺傳學畸變的特點。方法將32例手術切除經病理證實為HCC的癌組織，按照乙肝病毒與黃麯黴毒素的暴露情況分為4箇亞組：A組為HBV（+）/AFB1（+）10例；B組為HBV（+）/AFB1（-）10例；C組為HBV（-）/AFB1（+）6例；D組為HBV（-）/AFB1（-）6例。應用微陣列比較基因組雜交技術（Array CGH）檢測分析其22對染色體DNA拷貝數的變化。結果32例HCC樣本中，共髮現573箇染色體畸變區段（chromosomal aberrations，CNAs）。其中1q、4p、5p、6p、7p、8q、10p、17q、20p、20q和X主要錶現為擴增區段；1p、2q、4q、8p、9p、10q、11q、13q、14q、16p、16q、17p、19p、19q、21q、22q和Y主要錶現為缺失區段。同時，共檢測齣25箇染色體髮生高頻畸變的區段（recurrently altered regions，RARs)，其中1q21.1-q44、5p13.2-p15.3、6p12.1-p25.2、7q11.2-q35、8q11.2-q24.3、17q12-q25.2、18q12.3-q22.3和 X 為高頻率擴增區段，而1p31.1-p36.2、2q23.2-q37.2、4q12-q35.2、6q14.1-q26、8p12-p23.2、9p21.1-p24.2、10q21.3-q26.2、13q12.1-q21.1、14q21.3-q32.2、16p12.1-p13.2、16q12.1-q24.1、17p12-p13.3、19p13.1-p13.3、19q13.2-q13.4、21q21.3-q22.2、22q11.2-q13.2和Y染色體為高頻缺失區段。8p12-p23.2缺失的髮生率在進展期HCC(TNM分期為Ⅲ~Ⅳ期)中明顯高于早期HCC (TNM分期為I~II期)（P=0.038）。4q12-q35.2、13q12.1-q21.1的缺失及7q21.1-q35的擴增髮生率在A組中最高。Cox模型分析結果示：在單因素分析中AFP水平、腫瘤大小、TNM分期、BCLC分期、侵襲與轉移的髮生、8p12-p23.2的缺失以及19p13.1-p13.3的缺失等為影響患者無瘤生存時間的危險因素（P<0.05）。而在多因素分析中AFP水平、TNM分期以及8p12-p23.2的缺失等為影響患者無瘤生存時間的危險因素（P<0.05）。結論廣西地區HCC染色體遺傳學改變具有多樣性，其中染色體19p13.1-p13.3的高頻缺失可能為廣西地區HCC特有的分子生物學特徵之一。染色體8p12-p23.2的缺失可能為HCC的晚期事件，併且與患者的不良預後有關。染色體4q12-q35.2、13q12.1-q21.1缺失及7q21.1-q35擴增可能與HBV/AFB1雙因素的協同緻癌作用有關。
목적：연구을간병독/황곡매독소B1쌍폭로상관성간세포성간암（hepatocellular carcinoma，HCC）염색체유전학기변적특점。방법장32례수술절제경병리증실위HCC적암조직，안조을간병독여황곡매독소적폭로정황분위4개아조：A조위HBV（+）/AFB1（+）10례；B조위HBV（+）/AFB1（-）10례；C조위HBV（-）/AFB1（+）6례；D조위HBV（-）/AFB1（-）6례。응용미진렬비교기인조잡교기술（Array CGH）검측분석기22대염색체DNA고패수적변화。결과32례HCC양본중，공발현573개염색체기변구단（chromosomal aberrations，CNAs）。기중1q、4p、5p、6p、7p、8q、10p、17q、20p、20q화X주요표현위확증구단；1p、2q、4q、8p、9p、10q、11q、13q、14q、16p、16q、17p、19p、19q、21q、22q화Y주요표현위결실구단。동시，공검측출25개염색체발생고빈기변적구단（recurrently altered regions，RARs)，기중1q21.1-q44、5p13.2-p15.3、6p12.1-p25.2、7q11.2-q35、8q11.2-q24.3、17q12-q25.2、18q12.3-q22.3화 X 위고빈솔확증구단，이1p31.1-p36.2、2q23.2-q37.2、4q12-q35.2、6q14.1-q26、8p12-p23.2、9p21.1-p24.2、10q21.3-q26.2、13q12.1-q21.1、14q21.3-q32.2、16p12.1-p13.2、16q12.1-q24.1、17p12-p13.3、19p13.1-p13.3、19q13.2-q13.4、21q21.3-q22.2、22q11.2-q13.2화Y염색체위고빈결실구단。8p12-p23.2결실적발생솔재진전기HCC(TNM분기위Ⅲ~Ⅳ기)중명현고우조기HCC (TNM분기위I~II기)（P=0.038）。4q12-q35.2、13q12.1-q21.1적결실급7q21.1-q35적확증발생솔재A조중최고。Cox모형분석결과시：재단인소분석중AFP수평、종류대소、TNM분기、BCLC분기、침습여전이적발생、8p12-p23.2적결실이급19p13.1-p13.3적결실등위영향환자무류생존시간적위험인소（P<0.05）。이재다인소분석중AFP수평、TNM분기이급8p12-p23.2적결실등위영향환자무류생존시간적위험인소（P<0.05）。결론엄서지구HCC염색체유전학개변구유다양성，기중염색체19p13.1-p13.3적고빈결실가능위엄서지구HCC특유적분자생물학특정지일。염색체8p12-p23.2적결실가능위HCC적만기사건，병차여환자적불량예후유관。염색체4q12-q35.2、13q12.1-q21.1결실급7q21.1-q35확증가능여HBV/AFB1쌍인소적협동치암작용유관。
Objective To investigate genetic changes in individuals that may influence development of hepatocellular carcinoma (HCC)associated with hepatitis B virus (HBV)and exposure to aflatoxin B1 (AFB1). Method Patients with HCC were divided into four groups based on HBV infection and AFB1 exposure status:HBV(+)/AFB1(+),n=10;HBV(+)/AFB1(-),n=10;HBV(-)/AFB1(+), n=6;HBV(-)/AFB1(-),n=6.Array-based comparative genomic hybridization(Array CGH)was carried out on tumor tissue to identify genome-wide genetic changes. Result Among all 32 tissue samples,573 CNAs were identified,comprising 184 gains and 389 losses. Frequent gains were observed in the following regions:1q,4p,5p,6p,7p,8q,10p,17q,20p,20q and X.Frequent losses were observed in the following regions:1p,2q,4q,8p,9p,10q,11q,13q,14q,16p,16q,17p,19p,19q,21q,22q and Y.A total of 25 RARs were de-tected:8 RAR gains were 1q21.1-q44,5p13.2-p15.3,6p12.1-p25.2,7q21.1-q35,8q11.2-q24.3,17q12-q25.2,18q12.3-q22.3 and X;17 RARs losses were 1p31.1-p36.2,2q23.2-q37.2,4q12-q35.2,6q14.1-q26,8p12-p23.2,9p21.1-p24.2,10q21.3-q26.2,13q12.1-q21.1, 14q21.3-q32.2,16p12.1-p13.2,16q12.1-q24.1,17p12-p13.3,19p13.1-p13.3,19q13.2-q13.4,21q21.3-q22.2,22q11.2-q13.2 and Y.Loss of 8p12-p23.2 was associated with higher TNM tumor stage(TNM I-II:38.9% vs TNM Ⅲ:92.9%;P=0.038)and shorter tumor-free survival(P=0.045).Loss of 4q13.3-q35.2 and 13q12.1-q21.2 and gain of 7q11.2-q35 occurred at higher frequency among HBV(+)/AFB1(+)patients than among the other groups. Univariate analysis found tumor-free survival to be associated with tumor size,serum AFP,BCLC,TNM stage,invasion and metastasis,and loss of 8p12-p23.2(all P<0.05).Multivariate analysis revealed three of these fac-tors to be independently associated with tumor-free survival:serum AFP(≥400),TNM stage,and loss of 8p12-p23.2(all P≤0.045). Conclusion Several chromosomal alterations were identified in the genomes of individuals with HCC in Guangxi.Loss of 19p13.1-p13.3 may be a characteristic feature of the disease in this part of China. Loss of 8p12-p23.2 may occur later during HCC progression and is associated with shorter tumor-free survival. Loss of 4q12-q35.2 and 13q12.1-q21.1 and gain of 7q21.1-q35 may be associated with the synergistic hepatocarcinogenic effect of HBV infection combined with AFB1 exposure.