中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2013年
12期
955-959
,共5页
张雅春%胡卫杰%王建超%王伟%邓瑞坡%李越%赵颖慧%孟庆文
張雅春%鬍衛傑%王建超%王偉%鄧瑞坡%李越%趙穎慧%孟慶文
장아춘%호위걸%왕건초%왕위%산서파%리월%조영혜%맹경문
RIG-1%组织表达%抗病毒
RIG-1%組織錶達%抗病毒
RIG-1%조직표체%항병독
RIG-l%tissue expression%antiviral
视黄酸诱导基因蛋白1 (RIG-1)是一类模式识别受体,在机体抗病毒天然免疫过程中发挥重要作用.为检测金定鸭RIG-1基因的组织特异性表达水平和体外抗禽流感病毒(AIV)活性,本研究采用RT-PCR方法扩增鸭RIG-1基因并克隆于pcDNA3.1(+)中构建重组真核表达质粒pcDNA-RIG-1,应用荧光定量PCR方法检测该基因在鸭不同组织中的特异性表达水平;并将pcDNA-RIG-1转染DF-1细胞,通过病毒TCID50测定、间接免疫荧光、荧光定量PCR的方法检测RIG-1的抗AIV活性.结果显示,从金定鸭脾脏中扩增的RIG-1基因的CDS序列大小为2 802 bp,编码934个氨基酸;RIG-1基因在不同组织中的表达各不相同,在鸭的脾脏和肾脏中表达量较高,肝脏中度表达,心脏、肺脏和肌肉低度表达;pcDNA-RIG-1转染DF-1细胞组与pcDNA3.1(+)转染组相比,病毒TCID50及相对表达量显著降低,IFN-β及Mx的相对表达量显著升高,表明RIG-1产生了显著的抗AIV作用.本研究为禽类RIG-1蛋白功能和家禽的天然免疫研究奠定了基础.
視黃痠誘導基因蛋白1 (RIG-1)是一類模式識彆受體,在機體抗病毒天然免疫過程中髮揮重要作用.為檢測金定鴨RIG-1基因的組織特異性錶達水平和體外抗禽流感病毒(AIV)活性,本研究採用RT-PCR方法擴增鴨RIG-1基因併剋隆于pcDNA3.1(+)中構建重組真覈錶達質粒pcDNA-RIG-1,應用熒光定量PCR方法檢測該基因在鴨不同組織中的特異性錶達水平;併將pcDNA-RIG-1轉染DF-1細胞,通過病毒TCID50測定、間接免疫熒光、熒光定量PCR的方法檢測RIG-1的抗AIV活性.結果顯示,從金定鴨脾髒中擴增的RIG-1基因的CDS序列大小為2 802 bp,編碼934箇氨基痠;RIG-1基因在不同組織中的錶達各不相同,在鴨的脾髒和腎髒中錶達量較高,肝髒中度錶達,心髒、肺髒和肌肉低度錶達;pcDNA-RIG-1轉染DF-1細胞組與pcDNA3.1(+)轉染組相比,病毒TCID50及相對錶達量顯著降低,IFN-β及Mx的相對錶達量顯著升高,錶明RIG-1產生瞭顯著的抗AIV作用.本研究為禽類RIG-1蛋白功能和傢禽的天然免疫研究奠定瞭基礎.
시황산유도기인단백1 (RIG-1)시일류모식식별수체,재궤체항병독천연면역과정중발휘중요작용.위검측금정압RIG-1기인적조직특이성표체수평화체외항금류감병독(AIV)활성,본연구채용RT-PCR방법확증압RIG-1기인병극륭우pcDNA3.1(+)중구건중조진핵표체질립pcDNA-RIG-1,응용형광정량PCR방법검측해기인재압불동조직중적특이성표체수평;병장pcDNA-RIG-1전염DF-1세포,통과병독TCID50측정、간접면역형광、형광정량PCR적방법검측RIG-1적항AIV활성.결과현시,종금정압비장중확증적RIG-1기인적CDS서렬대소위2 802 bp,편마934개안기산;RIG-1기인재불동조직중적표체각불상동,재압적비장화신장중표체량교고,간장중도표체,심장、폐장화기육저도표체;pcDNA-RIG-1전염DF-1세포조여pcDNA3.1(+)전염조상비,병독TCID50급상대표체량현저강저,IFN-β급Mx적상대표체량현저승고,표명RIG-1산생료현저적항AIV작용.본연구위금류RIG-1단백공능화가금적천연면역연구전정료기출.
